Reporte de practica
Materia: realizar analisis inmunológicos
Practica # : 3
Nombre de practica : reacciones febriles
Alumno:
Introducción
Esta prueba representa un método de laboratorio útil para seguir
la secuencia
De ciertas infecciones con acceso febril, causadas por bacterias. Son
Reacciones de aglutinación entre los antígenos de Salmonella,
Brúcela y
Proteus y los anticuerpos contra estos antígenos presentes en el suero del
Paciente.
La fiebre es un mecanismo de defensa caracterizado por
hipertermia,
taquicardia, taquipnea, debilidad, intranquilidad o estupor. Se acompaña
de
artralgias, mialgias, anorexia, sed, elevación del pulso,
oliguria, sudoración,
sequedad de las mucosas y en ocasiones diversos síntomas
neurológicos.
Generalmente se presenta escalofrío previo a la
elevación de la temperatura.
Las enfermedades que presentan fiebre, tienen su origen
en las
infecciones, traumatismos, neoplasias, accidentes vasculares; por alteraciones
hematopoyéticas, inmunológicas
o del
metabolismo. El factor común es la lesión
tisular, cuyos productos
inducen a trastornos en la termorregulación cerebral.
Entre las enfermedades infecciosas que presentan el
síndrome febril
destacan la brucelosis, la fiebre tifoidea y paratifoidea, la escarlatina,
neumonías, paludismo, fiebre recurrente, hepatitis viral, talasemia,
peste y
antrax. 79
Durante el curso de las enfermedades anteriores, el cuerpo humano
forma anticuerpos, éstos ademas de ayudar a combatir la
infección sirven para
diagnosticar la enfermedad.
El aumento de anticuerpos contra determinado microorganismo en el suero de
un paciente, indica que estainfectado, estuvo
infectado recientemente, o fue
vacunado.
El título o cantidad de anticuerpos se forma o aumenta lentamente a
partir del
séptimo día de evolución de la enfermedad, alcanza su
maximo al
vigésimo día y decae mas tarde. Como regla general las pruebas de
aglutinación tienen mayor valor diagnóstico si se practican en forma
seriada,
(sueros pares), para observar si el título de la aglutinación
aumenta
progresivamente.
Fundamento
Estas reacciones consisten en el hecho de, cuando un
organismo humano es invadido por un antígenos infecciosos, este responde
en manera de defenderse dando así la producción de anticuerpos
aglutinantes, en la cual estos interactúan creando anticuerpos
específicos para estos antígenos. En la cual el
anticuerpo foja al antígeno una vez sido identificado. La
reacción mide el título de anticuerpos (aglutininas) en el suero
contra una Suspensión de antígenos. Entre los
antígenos que utilizamos se encuentran.
1. Tífico “O” (antígeno somatico
2. Tífico “H” (antígeno flagelar
3. Paratífico “A” (antígeno flagelar
4. Paratífico “B” (antígeno flagelar
5. Brúcela abortus
6. Proteus
La prueba se fundamenta en que el suero de un paciente con
Anticuerpos al mezclarse en vitro con bacterias muertas (antígeno)
causantes
de la infección, producen agregados o cúmulos, a ésta, se
le llama prueba de
aglutinación
Las reacciones febriles, constituyen una serie de pruebas serológicas,
para demostrar la presencia de anticuerpos aglutinantes contra ciertas
enfermedades causadas por bacterias, especialmente tifoidea, paratifoidea,
brucelosis y tifus exantematico; comúnmente se les conoce
comoreacción de
Widal para el caso de tifoidea y paratifoidea, de Huddleson para la brucelosis
y
de Weil Félix para el caso de tifus exantematico.
OX-19
La reacción de Widal en un método serológico usado
comúnmente en el diagnóstico de las fiebres tifoideas,
entérico y ondulante, la reacción mide el título del suero
contra una suspensión de microorganismo conocido
La reacción de Widal es un test basado en el principio de
aglutinación antígeno-anticuerpo, donde se determina la presencia
de anticuerpos contra el antígeno O y H de la Salmonella typhi para el
serodiagnóstico de fiebre tifoidea, sin embargo debido a su falta de
especificidad, debe ser interpretado en el contexto clínico del
paciente. Para considerar el diagnóstico de fiebre tifoidea con un
titulo Anti-O y Anti-H aislado, se debe conocer su prevalencia en una
determinada comunidad, en términos generales, se acepta títulos
anti-O y anti-H ≥1:160-200 y ≥1:50-100 en zonas endémicas y
no endémicas, respectivamente.
La fiebre tifoidea es una enfermedad infectocontagiosa de alta
prevalencia a nivel mundial, deriva su nombre del
latín tyvphos, que significa oscurecimiento de los sentidos o mente
turbia; es causada por la bacteria Salmonella typhi, nombrada así en
honor del
bacteriólogo estadounidense David Salmon.
Objetivo
Determinar y cuantificar atreves de esta técnicas, la identificar de
anticuerpos presentes en el suero sanguíneo y dar el diagnóstico
serológico de alguna enfermedad bacteriana.
Técnica
Aplicar tintura de yodo con una torunda de algodón sobre la
región
seleccionada para la venopunción. Empezar por el sitio central de la
venipuntura ejerciendo un moderado movimiento
haciaafuera en
círculos concéntricos.
Eliminar el exceso de yodo con una torunda de algodón impregnada de
alcohol.
Realizar la punción de la vena y extraer 5.0 ml de
sangre. En caso de
llevar a cabo simultaneamente el hemocultivo, tomar en condiciones de
esterilidad frente al mechero el doble de volumen sanguíneo y transferir
inmediatamente 5.0 ml en el medio de cultivo correspondiente.
Depositar la sangre en un tubo de hemólisis
para obtener el suero.
Dejar coagular y centrifugar a 2,000 rpm durante 10
minutos.
Transferir el suero con una pipeta Pasteur a otro tubo
de
13x100 mm y etiquetar.
Prueba cualitativa
Marcar con el lapiz graso sobre la placa de vidrio, 6 círculos de
3.5 cm
de diametro.
Depositar con la pipeta serológica 0.08 ml del suero por
probar en cada
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Agitar perfectamente cada uno de los antígenos y con el gotero que
acompaña a cada frasco, depositar una gota de un antígeno
diferente
(0.03 ml) para cada círculo.
Mezclar el suero y los antígenos con 6 aplicadores de madera limpios
(uno para cada círculo). Agitar rotando enérgicamente 25 veces durante
tres minutos, evitando que se mezclen las reacciones de los diferentes
círculos.
Frente a una lampara, observar inmediatamente si hay o no
aglutinación
y anotar cuales antígenos aglutinaron. Hasta
aquí la prueba se
considera cualitativa y se informa para cada antígeno.
Prueba cuantitativa
La prueba cuantitativa se realiza de acuerdo con los resultados positivos.
Colocar el suero positivo en otra placa limpia preparada en forma
semejante, marcar 4 círculos y de derecha a izquierda depositar los
siguientes volúmenes del suerocon la pipeta serológica 0.04,
0.02, 0.01
y 0.005 ml y agregar a cada uno de los cuatro círculos una gota
(0.03 ml) del mismo antígeno que dió positivo en la prueba
cualitativa.
Seguir las indicaciones de los incisos 10 y 11.
Determinar el título de anticuerpos o sea la dilución
maxima del
suero
donde es capaz de aglutinar.
La correspondencia a las diluciones es
0.08 ml suero + 0.03 ml antígeno = 1:20
0.04 ml suero + 0.03 ml antígeno = 1:40
0.02 ml suero + 0.03 ml antígeno = 1:80
0.01 ml suero + 0.03 ml antígeno = 1:160
0.005 ml suero + 0.03 ml antígeno = 1:320
Materia:
Gradilla
Muestra de sangre
6 porta objetos
Agitador
Equipo
centrifuga
filtro de luz
Reactivos
Tífico “O” (antígeno somatico)
Tífico “H” (antígeno flagelar)
Paratífico “A” (antígeno flagelar)
Paratífico “B” (antígeno flagelar)
Brúcela abortus
Esquema
Antígenos febriles
Bacteria / dx
Nombre /
infección
Nombre / prueba
Salmonella typhi “O
” Salmonella typhi
Tifoidea
Widal
Salmonella typhi “H”
Salmonella typhi
Tifoidea
Widal
Salmonella
paratyphi “A
Salmonella
paratyphi
Paratifoidea
Salmonella
paratyphi “B”
Salmonella
paratyphi
Paratifoidea
Brucella abortus
Brucella abortus
Brucelosis
Huddleson
Proteus OX 19
Rickettsia
prowazekii
Tifus
exantematico
Weil-Félix
Resultados
nombre del paciente:
Edad:
19 años
Sexo:
Masculino
Observaciones
Bibliografía
Manual de Laboratorio de Inmunología
Basica y Clínica José Luis Ortega Sanchez
Libro electrónico Manual de Laboratorio de Inmunología
Basica y Clínica. ®
2011