PRACTICA N°2
INSTRUMENTACION DEL
LABORATORIO. ESTERILIZACION. METODOS FISICOS Y QUIMICOS
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OBJETIVOS
-Entrenar al alumno en el reconocimiento de los diferentes equipos y materiales
de laboratorio, así como en el uso de los mismos y que
seran utilizados en la realización de los ejercicios de
laboratorio.
-Adiestrar al alumno en la limpieza y preparación del material para su
esterilización
I.-MATERIAL DE VIDRIO Y OTROS
Aparte del instrumental y variado equipo que se requiere en todo laboratorio de
Microbiología, el material de vidrio constituye una de las principales
herramientas de esta disciplina
-Matraces y balones (graduados)
-Kitasatos
-Probetas graduadas
-Pipetas:serológicas: terminales y subterminales, volumétricas,
Pasteur, automaticas y Micro pipetas
-Tubos de ensayo: 16x150, 15x125, 13x100, 10x75
-Capsulas o placas Petri
-Espatulas de Drigalsky
-Fiolas
-Varillas de Vidrio
-Beaker o vasos de precipitación
-Jeringas y agujas hipodérmicas
-Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, cultivos de tejidos
-Perlas de vidrio
II. MATERIAL DE OTRA NATURALEZA
-Trípodes
-Estuches cilíndricos
-Canastillas o cestos de metal
-Soportes universales
III.-EQUIPOS DE LABORATORIO
-Estufa - Incubadora
-Horno – Esterilizador
-Autoclave
-Baño María
-Mechero de Bunsen (gas)
-Mechero de alcohol
-Asa de siembra
-Microscopios Binocular y Monocular
-Campanas de Anaerobiosis
-Centrífugas
-Potenciómetro-Refrigeradoras y congeladoras
IV.-ESTERILIZACION
Es el procedimiento por el cual se destruyen los microrganismos y sus formas
resistentes, mediante el uso de agentes físicos y químicos
METODOS DE ESTERILIZACION
A.-ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS
-Esterilización por medio del calor
1.- Esterilización por acción del flameado:
El material se somete a la acción directa de la llama de un mechero, sin
que se altere ni sufra deterioro. Ejemplos: Asas de siembra, material de
disección
2.- Esterilización por el calor seco:
Se hace actuar el aire caliente sobre el material a esterilizar, por ejemplo el
vidrio seco y protegido se coloca en un horno a 180 °C por 30 a 45 minutos
3.- Esterilización por el calor húmedo:
Actúan coagulando las proteínas del protoplasma microbiano en
tiempo menor a la esterilización por aire caliente ejemplo, la
esterilización de los medios de cultivo o soluciones en Autoclave a 121
°C por 15 libras de presión por 15 minutos
-Esterilización en frio
1.- Esterilización en frio por filtración
Por este método se esterilizan los medios de cultivo líquidos o
sustancias organicas que sufren alteraciones de sus propiedades
físicas y químicas por acción del calor. Ejemplo:
solución de antibióticos
2.- Esterilización por centrifugación
Mediante la fuerza centrífuga es posible conseguir esterilización
de algunas sustancias y productos a grandes revoluciones por minuto, por un
tiempo prolongado
3.-Esterilización por acción de la luz UV
Corresponde al tiempo de radiación de la luz solar en la que su corta
longitud de onda seemplea para esterilizar medios de cultivo a base de
minerales, ambientes para siembras bacterianas, salas de cirugía
4.-Flujo laminar
El sistema de flujo laminar evita las turbulencias, regulando la velocidad de
circulación de aire. En el sistema horizontal, el aire
estéril es impulsado desde el fondo hacia el manipulador.
B.-ESTERILIZACION POR AGENTES QUIMICOS
Sustancias germicidas que actúan por efectos químicos,
inactivando proteínas. El proceso en sí puede ser de poder
bactericida, antiséptico o bacteriostatico en algunos casos
-Sustancias químicas aldehídos: ejemplo: -formol acuoso al 4 % en
24 horas de inmersión. Irrita los tejidos, tiene baja penetrabilidad,
desagradable olor y deja un residuo blanco sobre los materiales tratados
-Fenol y sus derivados:actúan a nivel de las
membranas celulares, inactivando enzimas y desnaturalizando proteínas;
es irritante y tiene mal olor, se usa para desinfectar mesas de
trabajo. Los derivados como el cresol y hexaclorofeno
mantienen su actividad en presencia de compuestos organicos, son
estables y persistentes, útiles en presencia de saliva, pus y heces.
Ejemplos: Halógenos, Alcoholes, Metales pesados, Agentes tensioactivos,
Compuestos de amonio cuaternario, Acidos organicos
Cuestionario
1.-Realizar graficas del material de vidrio presentado
y fundamentos: para que sirven?
2.-Realizar graficas de los equipos de laboratorio.
Fundamentos
3 Fundamente la esterilización por agentes
químicos
Materiales:
Por mesa de trabajo traer un pliego de papel kraft y
Un rollo de pabilo (o pita)
