Influencia de la concentración en la actividad de la amilasa

Objetivo:

Observar la acción de la enzima amilasa sobre polisacáridos (almidón) a distintas concentraciones
Comprobar la pre-digestión del almidón mediante el rompimiento de enlaces glucosídicos usando el colorante lugol.

Introducción:
La amilasa se encuentra en la saliva de muchos animales, incluyendo seres humanos, que utilizan el almidón como fuente de alimento. El almidón es la principal reserva de carbohidratos de las plantas; éste es un polisacárido compuesto de un gran número de monómeros de glucosa unidos entre sí. Por otra parte, la amilasa es la responsable de la digestión preliminar del almidón. En adición, la amilasa rompe las cadenas de moléculas de almidón para transformarlas en azucares simples, rompiendo los enlaces glucosídicos (1,4) del almidón. Más aún, la digestión de este polisacárido requiereotras enzimas presentes en el páncreas y en las secreciones intestinales.

Para que se facilite observar el proceso de transformación del almidón a maltosa se va a utilizar una solución I2, KI (lugol). Al momento de la implementación de esta solución, se observará cambios en el almidón no así en la maltosa, el cambio que se produce es el viraje de color a púrpura oscuro.

La tasa de desvanecimiento del almidón con distintas concentraciones de amilasa permitirá una medición cuantitativa de la tasa de reacción.

Materiales:
Tubos de ensayo de 15 ml
10 tubos de ensayo estándar
Lápiz de cera(o etiquetas)
Caja de muestra
Agua destilada
Vaso de precipitación con agua destilada 200ml
Cilindro graduado de 5ml
Pipeta calibrada de 1ml
2 Pipetas calibradas de 5ml
Pipetas Pasteur desechables
Pera de succión
Solución buffer pH= 6.8
Solución Lugol (I2, KI, H2O).
Solución de almidón 1%
Solución de amilasa 1%
Procedimiento
Preparar una disolución de amilasa (tubo de ensayo set 1)
a. Numerar 5 tubos de ensayo de 1 a 5
b. Usando los 5mL de la pipeta graduada, añada 5mL de agua destilada en cada tubo.
c. Hacer varias disoluciones de la siguiente manera (use una probeta)
Tubo1: añadir 5mL de amilasa y mezclar frotando el tubo entre sus manos (disolución 1:1; 0.5% de amilasa)
Tubo2: añadir 5mL de solución de amilasa del tubo 1 y mezclar (disolución 1:3; 0.25% de amilasa)
Tubo3: añadir 5mL de solución de amilasa del tubo 2 y mezclar (disolución 1:7; 0.125% de amilasa)
Tubo4: añadir 5mL de solución de amilasa del tubo 3 y mezclar(disolución 1:15; 0.063% de amilasa)
Tubo5: añadir 5mL de solución de amilasa del tubo 4 y mezclar (disolución 1:31; 0.031% de amilasa)
La función de nutrición es fundamental para la supervivencia de los seres vivos, ya que les permite crecer, desarrollarse, renovar los tejidos dañados o viejos y disponer de la energía necesaria para el funcionamiento del organismo.
Hay dos tipos de nutrición: la autótrofa y la heterótrofa.
* Los seres vivos autótrofos, son aquellos capaces de fabricar la materia orgánica que constituye su alimento, a partir de sustancias inorgánicas sencillas (H2O, CO2 y sales minerales) y utilizando una fuente de energía. El proceso autótrofo más común en los seres vivos es la fotosíntesis, que utiliza como fuente de energía la luminosa procedente del Sol y que es captada por un pigmento denominado clorofila.
* Los seres vivos heterótrofos, son aquellos que no pueden fabricar la materia orgánica que constituye su alimento y tienen que tomarla del medio: comiéndose a otros seres vivos, sus productos o sus restos.
Función de relación: estimulo/respuesta
Función de relación
Es la capacidad de los seres vivos de captar señales procedentes del medio (externo e interno) y de responder a ellas, es decir nos permite darnos cuenta de lo que ocurre a nuestro alrededor y actuar en función de ello. La función de relación también es muy importante para la supervivencia de los seres vivos pues nos permite nutrirnos, reproducirnos y protegernos del medio donde vivimos (resguardarnos del frío, del calor, etc.) y de otros seres vivos.
Función de reproducción
Es la capacidad de los seresvivos de fabricar nuevos seres semejantes en su anatomía y en su fisiología a sus progenitores. La función de reproducción no es fundamental para la supervivencia de un ser vivo. Sin embargo la reproducción es fundamental para el mantenimiento de la vida misma, ya que si los seres vivos no se reprodujeran las especies se extinguirían y con ellas, la vida. Al igual que en la nutrición hay dos grandes tipos de reproducción: la reproducción asexual y la reproducción sexual.
* La reproducción asexual se produce cuando no intervienen células especializadas y no hay intercambio genético, por lo que los descendientes son genéticamente idénticos a su progenitor.
* La reproducción sexual se produce cuando intervienen células especializadas (gametos) de diferente sexo y ocurre una mezcla de la información genética contenida en ellas.
EL HOMBRE: FUNCIONES VITALES.

El hombre es un animal vertebrado que pertenece al grupo de los mamíferos.

El hombre como todos los seres vivos, nace, crece, nota los cambios que se producen a su alrededor, se reproduce y muere.

Todos los actos que los seres vivos realizan para vivir se llaman funciones vitales. Las funciones vitales pueden resumirse en tres: función de nutrición, función de relación y función de reproducción.

FUNCIÓN DE NUTRICIÓN.-

El hombre se nutre tomando oxígeno del aire por medio de los pulmones, tomando alimentos y transformándolos en el aparato digestivo y distribuyendo los alimentos por todo el cuerpo por medio de la sangre.

FUNCIÓN DE RELACIÓN.-
Elhombre se relaciona con los demás seres vivos por medio de los sentidos y del aparato locomotor. Así percibe lo que pasa a su alrededor, nota los cambios, se desplaza, etc.

FUNCIÓN DE REPRODUCCIÓN.-

El hombre se reproduce de forma vivípara, es decir, nace del vientre de su
madre como los otros animales mamíferos.

ÓRGANOS Y APARATOS.-

El hombre realiza sus funciones vitales por medio de órganos y aparatos.

En el cuerpo humano hay muchos órganos. Los ojos, los pulmones, el corazón, el estómago, los músculos, etc., son órganos.

El conjunto de órganos que realizan la misma función forman un Lave correctamente la probeta

1. Preparar los tubos de ensayo (set 2)
a. Numere un segundo set de cinco tubos de ensayo de 1 al 5.
b. Comience con el tubo 5 del primer set, transfiera 2mL de la disolución en el tubo 5 del segundo set. Use una pipeta de 5mL para hacer la transferencia. Lave la pipeta en agua destilada y repita el procedimiento para los tubos 4, 3 y 2 transfiriendo 2mL al tubo 4 del primer set al tubo 4 del segundo set y sucesivamente. Al finalizar todas las transferencias, el tubo 1 del primer set no será utilizado.
c. Añadir 40 gotas de pH 6.8 de la solución buffer a cada tubo in el segundo set, Mezclar los tubos adecuadamente entre sus manos y colocar los tubos a un lado.
d. Añadir de 1 a 2 gotas de lugol a cada compartimiento de las cuatro columnas de la caja de muestras. Se utilizara una columna diferente para cada concentración de amilasa.
e. Usando el segundo set de tubos, proceda con la prueba empezando con el tubo 5 de este set
(1) Utilice una pipeta limpia de 1mL y añada 1mL de la solución de almidón 1% al tubo 5 y mezcle el tubo entre sus manos. Registrar el tiempo (se llamara tiempo 0)
(2) Rápidamente remueva una gota de la mezcla a la pipeta Pasteur desechable, y añadir 1 gota de lugol en el primer compartimiento de la caja de muestra nombrada como tiempo 0.
(3) Testear la reacción de la mezcla en intervalos de tiempo de 10 segundos, cada tiempo usando un compartimientode la caja de muestras. Continúe hasta que el color azul desaparezca y el lugol continúe de color amarrillo ámbar (indicador de la digestión del almidón). Registre el tiempo que tomo la digestión del almidón.
(4) Repetir los pasos 1-4 para las otras 4 concentraciones de los tubos 4,3,2 y 1 del set 2 de los tubos de ensayo)
2. Finalice creando la tabla de resultados en la cual se registrara los mismos, y establezca sus conclusiones así como también sus discusiones.