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Anticuerpos Clonales y Policlonales - ¿Qué son los anticuerpos policlonales?, ¿Para qué son utilizados?, Que es un anticuerpo monoclonal?
INTRODUCCION
Desde el descubrimiento de la inmunología el campo de la salud a tenido
importantes cambios ya que por medio de los anticuerpos se han desarrollado
innumerables métodos de curas y su avance continua en investigaciones de
laboratorios del mundo del campo científico se estima aun hacer grandes
avances para muchas de las enfermedades mortales que hoy en dia padece el hombre
producto de agentes extraños.
OBJETIVOS
Demostrar la gran utilidad de los anticuerpos tanto monoclonales como
policlonales y su variedad.
Conocer su importancia en el campo biomédico de la
salud.
¿Qué son los anticuerpos policlonales?
Definicion
Anticuerpos policlonales son anticuerpos derivados de diferentes
líneas de células B, los linfocitos encargados de la
respuesta ante elementos ajenos (antígenos) mediante anticuerpos.
Los anticuerpos policlonales son una mezcla de inmunoglobulina, secretados
en contra de un antígeno específico,
cada una reconociendo diferentes epitopos.
Como se obtiene?
Habitualmente se obtienen de lo que se denomina un antisuero.
Obtenido de la inyección reiterada de un antígeno en
un animal, con el fin de generar una respuesta inmune. De este
animal se toma una muestra de sangre y de esta muestra es obtenido el suero que
finalmente es purificado para obtener la variedad de anticuerpos policlonales
de interés.
El mamífero es inmunizado. Normalmente se usa
un ratón, cabra, o conejo; sin embargo, la utilización de los
mamíferos enormes tiene la capacidad de ser ventajoso ya que suministran
una mayor cantidad de plasma sanguíneo.Cuando se inyecta el
antígeno, los recursos de la célula B producen los anticuerpos
policlonales, los cuales después son tomados del plasma de los animales
y purificados. A distinción de los anticuerpos
monoclonales, los anticuerpo policlonales son extraídos de mas de
una línea celular. Estos anticuerpos asisten a
los médicos en muchas practicas clínicas.
¿Para qué son utilizados?
Los anticuerpos policlonales son bastante efectivos cuando se refiere a examinación sanguínea. Estos anticuerpos
estan conectados a las proteínas, y debido a que varios
desórdenes sanguíneos son localizados con precisión por la
existencia de proteínas irregulares en la sangre, los anticuerpos
policlonales pueden asistir a los médicos a localizar bastante temprano
estas enfermedades. Los anticuerpos policlonales también pueden ser
usados en prueba de tejido para buscar antígenos específicos en
los distintos tejidos del cuerpo. La utilización
de anticuerpos policlonales en prueba de tejido también ha asistido a
caracterizar y detectar el cancer de seno. Otra
utilización fascinante de los anticuerpos policlonales es su asistencia
en el tratamiento de picadas y mordidas venenosas.
Mientras que los anticuerpos monoclonales y policlonales son
bastante eficientes en el mundo de la medicina, (los anticuerpos) son
producidos de manera bastante distinta y pueden ser útiles en distintas
formas. Los anticuerpos policlonales son muy útiles tanto en
pruebas sanguíneas como en pruebas de tejidos;
ademas pueden ayudar a diagnosticar serias enfermedades.
Que es un anticuerpo monoclonal?
Un anticuerpo
monoclonal esun anticuerpo homogéneo producido por una
célula híbrida producto de la fusión de
un clon de linfocitos B descendiente de una sola y
única célula madre y una célula
plasmatica tumoral.
Los anticuerpos monoclonales son anticuerpos idénticos porque son
producidos por un solo tipo de célula del sistema inmune,
es decir, todos los clones proceden de una sola célula madre. Es posible
producir anticuerpos monoclonales que se unan específicamente con
cualquier molécula con caracter antigénico. Este fenómeno es de gran utilidad en bioquímica, biología
molecular y medicina.
Para producir anticuerpos monoclonales,
primero se extraen células B del bazo de un
animal que ha sido expuesto al antígeno. Estas células B son
fusionadas en presencia de PEG (polietilenglicol) con células tumorales
de mieloma múltiple (un tipo de
cancer) que pueden crecer indefinidamente en cultivo celular. Esta fusión hace a las membranas celulares mas
permeables. Estas células fusionadas
híbridas, llamadas hibridomas pueden multiplicarse
rapida e indefinidamente, puesto que son células tumorales
después de todo y pueden producir gran cantidad de anticuerpos.
Los hibridomas son suficientemente diluidos y cultivados para obtener un número diferente de determinadas colonias, las
cuales producen sólo un tipo de anticuerpo. Los anticuerpos de
diferentes colonias son analizados para conocer su capacidad de unirse a un antígeno determinado, por ejemplo con un tipo de
test llamado ELISA, y para seleccionarse y aislarse de la manera
mas efectiva.
Los procesos de obtener anticuerpos monoclonanes son los siguientes: Primero se
disgrega el bazo del ratóninmunizado, donde se acumulan los linfocitos B
que tienen una escasa viabilidad en cultivo, y se fusionan con células
de mieloma deficientes en enzimas implicados en la síntesis del nuevo
ADN como la timidina quinasa (TK) o la hipoxantina guanina
fosforibosil transferasa(HGPRT). Los productos de la
fusión celular (hibridomas) son cultivados en medio HAT (de hipoxantina,
aminopterina y timidina) donde las células mielómicas son eliminadas.
Solamente pueden crecer en el medio de cultivo HAT las células que son
producto de la fusión entre un linfocito y una
célula de mieloma. Las células híbridas obtenidas tras el
proceso de fusión contienen un número
elevado de cromosomas (72 del mieloma y 40 del linfocito B) que en
las sucesivas divisiónes celulares se iran perdiendo hasta
oscilar entre los 70 y los 80 cromosomas. Como consecuencia
de dicho proceso, algunas células pierden la capacidad de
secreción de anticuerpos o bien funciones basicas para la
viabilidad celular. Por ello tan pronto como se identifica como positivo un pocillo se somete a un
proceso de clonación para evitar el crecimiento de células no
productoras que al ser metabólicamente mas eficientes
acabarían por dominar el cultivo.
Para que sirven?
Una vez que se han producido anticuerpos monoclonales que se unen a
determinadas sustancias, estos pueden ser usados para detectar la presencia y
cantidad de esta sustancia, gracias a la prueba de Western blot, que
detecta una sustancia en una solución o con una prueba
de inmunofluorescencia, que detecta una sustancia en una célula
entera. Los anticuerpos monoclonales también son usados para purificar
unasustancia con técnicas llamadas inmunoprecipitación
y cromatografía.
Los anticuerpos monoclonales muestran una serie de ventajas sobre los
anticuerpos policlonales como
1. Mayor homogeneidad.
2. Reproductibilidad de sus efectos, como consecuencia de su
homogeneidad.
3. Mayor capacidad potencial de seleccionar los
mejores anticuerpos en afinidad, tipo de reconocimiento.
Los anticuerpos monoclonales se utilizan en muchos campos como
La investigación biomédica, como la identificación y
clonación de genes, la identificación y aislamiento
de proteínas, la activación de enzimas, conocimiento de
la estructura molecular y morfogénesis.
Diagnóstico: En medicina, gracias a la gran especificidad y
capacidad practicamente ilimitada de los anticuerpos monoclonales para
reconocer cualquier estructura química, permite la detección
de hormonas, vitaminas, citocinas; la monitorización de
drogas, detección de enfermedades
infecciosas en microbiología; la detección de alergenos
en alergia, hematología,marcadores tumorales e infartos de miocardio,
aplicaciones forenses, inmunoescintografía. En las ténicas
diagnósticas se emplean diversas herramientas de biología
molecular como ELISA,
EIA, citometría, inmunohistoquímica, inmufluorescencia.
Los anticuerpos monoclonales son unas de las sustancias
mas utilizadas en los laboratorios de diagnóstico.
Catalisis: Los anticuerpos monoclonales se han
utilizado como catalizadores de
múltiples reacciones químicas.
Biosensores: Los anticuerpos monoclonales acoplados a transductores
electrónicos pueden detectar tanto moléculas organicas como
inorganicas comola contaminación de metales pesados en
alimentos y agua, detección de gases tóxicos, etc. Un biosensor es un instrumento analítico
formado por un material biológico inmovilizado como una enzima, anticuerpo, célula
entera, organulo o combinaciones de los mismos, en íntimo
contacto con un sistema transductor adecuado que convierta la señal
bioquímica en una señal eléctrica cuantificable.
Tratamiento: Las aplicaciones terapéuticas constituyen el campo
mas importante de los anticuerpos monoclonales, ya que son capaces de destruir
células, incluidas las tumorales, mediante distintos mecanismos. Se
emplean en el tratamiento de diversas enfermedades autoinmunes como
la artritis reumatoide, el cancer o para evitar el rechazo tras
un trasplante. Existen varios anticuerpos monoclonales aprobados para su uso en determinadas enfermedades.
Diversidad de anticuerpos
Practicamente todos los microbios pueden desencadenar una respuesta de
anticuerpos. El reconocimiento y la erradicación exitosa de
muchos tipos diferentes de microbios requiere la diversidad entre los
anticuerpos, su composición de aminoacidos varía lo que
les permite interactuar con muchos antígenos diferentes.
Se ha estimado que los seres humanos generan unos 10 mil millones de
anticuerpos diferentes, cada una capaz de unirse a un
epítopo diferente de un antígeno. A pesar de un
enorme repertorio de diferentes anticuerpos se genera en una sola persona, el
número de genes disponible para hacer estas proteínas es limitado
por el tamaño del
genoma humano.
Varios mecanismos genéticos complejos que han
evolucionado permiten a las células de vertebrados B para generarun
grupo diverso de anticuerpos a partir de un número relativamente
pequeño de genes de anticuerpos.
Variabilidad de dominio
La región (locus) de un cromosoma que codifica un anticuerpo es grande y
contiene varios genes distintos para cada dominio de los anticuerpos que
contiene el locus de los genes de la cadena pesada (CIB @) se encuentra en el
cromosoma 14, y los lugares que contengan lambda y kappa luz genes de la cadena
(IGL @ e IGK @) se encuentran en los cromosomas 22 y 2 en los seres humanos.
Uno de estos dominios se llama el dominio variable, que
esta presente en cada cadena pesada y ligera de todos los anticuerpos,
pero pueden diferir en distintos anticuerpos generados a partir de
células B diferenciadas.
Las diferencias entre los dominios variables, se encuentran en tres bucles
conocidos como
regiones hipervariables (HV-1, HV-2 y AT-3) o regiones determinantes de
complementariedad (CDR1, CDR2 y CDR3). Los CDR son
compatibles dentro de los dominios variables por regiones de estructura
conservada.
El locus de la cadena pesada contiene alrededor de 65 genes diferentes
variables de dominio que todas difieren en su CDRs. La combinación de
estos genes con una serie de genes de otros dominios del anticuerpo genera una
caballería de gran cantidad de anticuerpos con un alto grado de
variabilidad.
Esta combinación se llama V (D) J recombinación
discuten a continuación.
V (D) J recombinación
Recombinación somatica de las inmunoglobulinas, también
conocido como''V (D) J recombinación'', implica la generación de
una región variable de inmunoglobulina única. La región
variable de cada cadena pesadade inmunoglobulina o la luz
se codifica en varias piezas conocidas como
segmentos de genes. Estos segmentos se llaman variable (V),
diversidad (D) y de unión (J) segmentos.
Hipermutación somatica y maduración de la afinidad
Después de la activación con el antígeno, las
células B comienzan a proliferar rapidamente. En estas
células se dividen rapidamente, los genes que codifican los
dominios variables de las cadenas pesadas y ligeras sufren una alta tasa de mutación puntual, por un proceso
llamado''''hipermutación somatica (SHM). SHM resultados en
aproximadamente un cambio de nucleótido por gen
variable, por la división celular.
Algunas mutaciones puntuales se traducira en la producción de
anticuerpos que tienen una interacción débil (baja afinidad) con
su antígeno que el anticuerpo original, y algunas mutaciones se generan
anticuerpos con una interacción mas fuerte (de alta afinidad).
Las células B que expresan anticuerpos de alta
afinidad en su superficie recibiran una señal de supervivencia
fuerte durante las interacciones con otras células, mientras que
aquellos con anticuerpos de baja afinidad no, y se mueren por apoptosis.
Clase de conmutación
Isotipo o cambio de clase es un proceso
biológico que ocurre después de la activación de las
células B, que permite a la célula para producir diferentes
clases de anticuerpos (IgA, IgE o IgG).
Cambio de clase se produce en el gen de la cadena pesada lugar por un mecanismo llamado recombinación de cambio de clase
(CSR). Este mecanismo se basa en motivos conservados de nucleótidos,
llamado''el interruptor (S) regiones'', que se encuentra en el ADN aguasarriba
de cada gen de la región constante (excepto en el δ de la cadena).
La hebra de ADN se rompe por la actividad de una serie de enzimas en los dos
seleccionados de S-regiones. El exón del dominio
variable se reincorporó a través de un proceso llamado de
extremos no homólogos de unión (NHEJ) a la región deseada
constante (γ, α o ε). Este proceso resulta en un
gen de la inmunoglobulina que codifica un anticuerpo de un isotipo diferente.
CONCLUSION
Los anticuerpos son de gran importancia para su aplicación laboral de
caracter medico hoy en dia las enfermedades mas mortales a veces
dependen del punto de vista inmunológico posiblemente una de las
soluciones a esas enfermedades atroces esta en la ciencia de la inmunología
se espera con los avances científicos obtener una respuesta a lo que el
organismo no puede combatir y que tiene que ver directamente con las
células de defensa.
BIBLIOGRAFIA
https://www.articuloz.com/medicina-alternativa-articulos/anticuerpos-policlonales-5599867.html
https://salud.kioskea.net/faq/1629-hemograma-completo-tipos-de-globulos-blancos
https://www.javeriana.edu.co/universitas_scientiarum/universitas_docs/vol10n1/4-OBTENCION.pdf
https://www.articulo.tv/?Exactamente-que-son-anticuerpos-policlonales&id=4938
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