PRACTICA No3

PREPARACION DE SOLUCIONES REGULADORAS.

INTRODUCCION

Las soluciones reguladoras pueden definirse como una mezcla en equilibrio de un par acido de Bronsted + base conjugada, la cual es capaz de resistir la adición de acidos o bases fuertes, manteniendo el pH constante o con cambios muy ligeros.

OBJETIVO

En este experimento pretendemos preparar una solución reguladora de acuerdo a calculos químicos previamente realizados, y verificar su pH en el potenciómetro.

FUNDAMENTO

La preparación de soluciones reguladoras a partir de sus materias primas, se puede hacer empleando cualquiera de los tres métodos siguientes:

a).- Pesar los gramos de HA y A- separadamente y luego disolverlos en el volumen apropiado de agua.
b) Mezclar los volúmenes necesarios de HA y A- y aforar con agua destilada si se requiere
c).- Pesar los gramos de compuesto que nos proporcionara tanto HA como A- , disolverlos en una pequeña cantidad de agua; agregar el volumen necesario de acido fuerte y completar con agua destilada hasta el volumen deseado.

MATERIAL: REACTIVOS

1 vaso de precipitado de 400 ml. Acido benzóico
1 probeta graduada benzoato de sodio
1 pipeta de 5 ml.
1 matraz de aforación de 250 ml.
1 agitador de vidrio
1 piceta de agua destilada.

P A R T E E X P E R I M E N T A L :

Preparar 250 ml. de un regulador de Benzoatos 0.1M pH=5 a partir de acido benzóico sólido(P.M.= 122) y Benzoato de sodio sólido (P.M. = 144). El pKa del acido benzoico es de 4.18.
Realizar los calculos correspondientes de acuerdo con las indicaciones del asesor.

SECCION DE PREGUNTAS

1.- Indique el nombre completo, el pKa de los siguientes compuestos usados como reguladores del pH en bioquímica.

Porque los aminoacidos actúan como reguladores de pH.

Menciona cuando menos 3 amortiguadores biológicos indicando su mecanismo de acción

B I B L I O G R A F I A :

Bohinski, R.C. 1987. Bioquímica. 2ª edición. SITESA. pp 35 - 50

Dawson, R.M.C et al. 1972. Data for Biochemical Research. 2ª Edition
Oxford University Press, Ely House London W.I.

PRACTICA No.4

SOLUCIONES REGULADORAS

INTRODUCCION

El funcionamiento correcto de los sistemas biológicos requiere un control efectivo del pH, ya que los procesos metabólicos se inactivan fuera de ciertos límites de acidez. El pH óptimo de las enzimas es un factor importante para establecer el rango de pH que podría tener un compartimiento intra o extracelular.
Las células mantienen una concentración de hidrógeno dada, aún cuando puedan ser producidos acidos o bases internamente, o que el pH del medio ambiente pueda cambiar. Este control es efectuado por sistemas amortiguadores de pH denominados “Buffers “amortiguadores” ó “Soluciones reguladoras”.

OBJETIVO

Determinar la actividad de las soluciones reguladoras frente a los acidos fuertes y basesfuertes, y ademas probar su efectividad en el control del pH, comparandola con una solución amortiguadora como el agua ó la solución salina.

FUNDAMENTO

El par acido de Bronted + Base conjugada que integran una solución reguladora, pueden formar con un acido débil y su sal o una base débil y su sal. El mecanismo como funciona dicha solución reguladora es el siguiente:

Una solución reguladora que contiene acido acético y acetato de sodio en cantidades equimoleculares, reaccionara con cualquier acido o base agregados de acuerdo con las siguientes ecuaciones químicas:
1.- AL AGREGAR UN ALCALI (NaOH)

OH- + CH3COOH CH3COO- + H2O
alcali agregado acido acético de anión acetato
la mezcla reguladora
Al agregar el alcali fomenta una disociación mayor del acido para proporcionar los protones necesarios y por lo tanto conservar la concentración de H+ y el pH no cambia.
AL AGREGAR ACIDO (HCl)

H+ + CH3COO- CH3COOH
acido agregado anión acetato de acido acético
la mezcla reguladora
Al agregar acido, los protones se combinan instantaneamente con el anión CH3COO- presente en la mezcla para formar el acido débil no disociado (CH3COOH) en consecuencia el cambio del pH es mucho menor que el que ocurriría si la base conjugada estuviera ausente.

M A T E R I A L Y E Q U I P O

5 vasos de ppdo. de 250 ml.2 pipetas de 5 ml.
1 agitador de vidrio
potenciómetro.

REACTIVOS

NaOH 0.1 M: Disolver con agitación 0.4 gramos de Hidróxido de sodio en 50 ml. de agua fría, y aforar a un volumen final de 100 ml. con agua destilada fría.

HCl 0.1M: En 10 ml. de agua destilada adicionar 0.83 ml. de acido clorhídrico, mezclar, aforar a 100 ml. con agua destilada.

NaCl 0.9 % Disolver 0.9 gr. de cloruro de sodio en 50 ml. de agua destilada, disolver y aforar hasta completar un volumen de 100 ml.

Soluciones reguladoras preparadas en la practica anterior.

PARTE EXPERIMENTAL

Cada equipo trabajara con una solución reguladora, llevando a cabo los siguientes experimentos:

I.- SOLUCION REGULADORA + BASE FUERTE
a) Transferir 100 ml. del regulador indicado a un vaso de precipitados de 250 ml.

b) Determine el pH de la solución, el cual sera registrado como pH inicial.

c) Añada 5 ml. de NaOH 0.1 M en alícuotas de 0.5 ml., determinado el pH de la solución después de cada adición de alcali, registre sus lecturas.

II.- SOLUCION REGULADORA + ACIDO FUERTE
a) Repita los pasos a y b anteriores

b) Añada 5 ml. de HCL 0.1M en alícuotas de 0.5 ml., determinando el pH de la solución reguladora después de cada adición de acido. Registre sus datos.

III.- AGUA DESTILADA O SOLUCION SALINA + BASE FUERTE
a) Transfiera 100 ml. de agua destilada o solución salina a un vaso de ppdo.

b) Determine el pH inicial yregóstrelo.

c) Añada 5 ml. de NaOH 0.1M en alícuotas de 0.5 ml., determinando el pH tras cada adición. Anote los datos.

IV.- AGUA DESTILADA O SOLUCION SALINA + ACIDO FUERTE

a) Repita los pasos a y b del experimento III
b) Adicionar 5 ml. de HCL 0.1M en alícuotas de 0.5 ml. haciendo determinaciones del pH tras cada adición. Anote sus valores.

RESULTADOS

Todos los datos obtenidos en los experimentos anteriores se tabularan en la hoja siguiente de los cuadros de tabulaciones.

SECCION DE PREGUNTAS

1. Defina lo que significa capacidad Buffer.

2. Detalle el mecanismo de reacción del amortiguador biológico que actua en los eritrocitos para contrarrestar la acidez proporcionada por el acido carbónico.

BIBLIOGRAFIA

Ramsey Bronk, J. 1980. Biología Química, Una Introducción a la Bioquímica
1ª Edición en español Compañía Editorial Continental , S.A.
pp 72 - 74.

Conn, E.E. and.P.K. Stumf. 1972. Outlines of Biochemistry. 3ª Edición Willey International Edition. pp 3 - 20.

RESULTADOS
Tabule los datos obtenidos en sus experimentos.

I.-------- ----- ------ ----- ----- ----- II.-------- ----- ------ ----- ----- --------



III.- -------- ----- ------ ------------ IV.- -------- ----- ------ ----- ----- ------



Los resultados de las tablas anteriores expréselos en forma de 4 graficas en papel milimétrico