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Determinación de nitrógeno total - OBJETIVOS, Materiales y Métodos , PROCEDIMIENTODETERMINACIÓN DE NITRÓGENO TOTAL El nombre procede II. OBJETIVOS * Determinar el contenido de nitrógeno total que constituyen los diversos alimentos, los cuales son de origen animal por el método Semi- micro Kjeldahl. III. Fundamento Las proteínas estan formadas por cadenas de aminoacidos de cuya composición el nitrógeno es facilmente valorable. Los compuestos nitrogenados son descompuestos por acción El método Kjeldahl consta de tres etapas: a) Digestión : Se produce la siguiente reacción: Materia organica+ H2SO4SO4NH42+CO2+H2O Sulfato de amonio b) Destilación El nitrógeno que esta en forma de sulfato de amonio s descompuesto por el hidróxido de sodio (NaOH) y calor desprendido Amonio (NH4). El vapor de agua arrastra al amonio SO4NH42+2NaOH 2Na2SO4+ NH4OH NH4OH NH3+H2O NH4OH+H3BO3 NH4H2BO3+ H2O c) Titulación Consiste en titular con HCL 0.1 N la base de borato de amonio, determinandose así la cantidad de amoniaco en forma indirecta. La reacción es NH4H2BO3+HCL H3BO3+ NH4CL IV. Materiales y Métodos * Digestor, balones Kjeldahl de 100ml * Equipo estilados Kjeldahl * Balanza analítica * Erlenmeyers, buretas, pipetas, Fiolas de 100 y 250 ml. * Probetas de 10 ml y 100 ml * Acido sulfúrico concentrado * Acido borico al 3% * Catalizador : mezcla de K2SO4+CuSO4 5 H2O en la proporción de 9: 1 * Hidróxido de sodio al 30% * Acido clorhídrico HCL 0.1 N(valorado) * indicador rojo de metilo enmascarado. V. PROCEDIMIENTO 1. Digestión * Coloque un balón de Kjeldahl de 100ml 0.1 g de muestra seca y deshidratada * Agregué un gramo de catalizador * Añada 10 ml de acidosulfúrico concentrado y agite suavemente * Coloque el balón a calentamiento en el digestor * La digestión dura aproximadamente 3 horas y se considera terminada cuando el contendió * Se recomienda que con las muestra debe llevarse acabo un blanco( se colocan todos los reactivos menos la muestra y deben analizarse por duplicado) 2. Destilación * Terminada la digestión agregue agua destilada al balón Kjeldahl hasta la mitad en pequeñas proporciones enfriando externamente en agua hasta que este completamente frio. * Transfiera el contenido del balón Kjeldahl al balón de destilación * Conecte el equipo de destilación a modo que el extremo inferior del refrigerante este inmerso en el erlenmeyer y que contenga 25 ml de acido borico al 3% y 2 gotas del indiciador rojo de metilo enmascarado. * Haga circular agua por el sistema refrigerante * Agregué lentamente 5 ml de NaOH al 30 % * El tiempo de destilación va a ser 30 minutos aproximadamente * Verifique el término de la destilación colocando un papel de tornasol en el extremo inferior * Retire luego el erlenmeyer con el destilado y apague el mechero 3. Titulación * Valore el destilado * Anote gasto * Proceda de igual forma con el blanco VI. CALCULOS %N=B-AxFxDx0.0014x100s *Donde: B: ml A: gasto del blanco en ml F: factor de HCL 0.1 N D: proporción de a muestra descompuesta diluida S: peso de muestra en gramos % Proteina Bruta=%Nx6.25 * Donde : % N = Porcentaje de Nitrógeno 6.25= Factor Constante Luego por diferencia de porcentaje de proteína bruta de esta practica y la anterior obtendremos el nitrógeno total * Para Caballa Peso de muestra: 0.1374 Gasto de la muestra: 2.65 %N=2.65-0.04x1x10x0.0014x1000.1374 %N=26.59 % Proteina Bruta=26.59x6.25=166.18% * Para Jurel Peso de muestra: 0.1594 Gasto de la muestra: 2.30 %N=2.30-0.04x1x10x0.0014x1000.1594 %N=19.84 % Proteina Bruta=19.84x6.25=124.05% * Para Pota Peso de muestra: 0.1331 Gasto de la muestra: 2.55 %N=2.55-0.04x1x10x0.0014x1000.1331 %N=26.40 % Proteina Bruta=26.40x6.25=165% * Por diferencia : 1) Jurel : % Proteina Bruta=19.84x6.25=124.05% % Proteina Bruta=11.51x6.25=71.94% %N total=52.11% 2) Caballa: % Proteina Bruta=26.59x6.25=166.18% % Proteina Bruta=13.86x6.25=86.62% %N total=79.56% 3) Pota: % Proteina Bruta=26.40x6.25=165% % Proteina Bruta=12.20x6.25=76.25% %N total=88.75% Política de privacidad |
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