Descubrimiento de los Acidos Nucleicos
El descubrimiento de los acidos nucleicos se debe a Meischer (1869), el
cual trabajando con leucocitos y espermatozoides de salmón, obtuvo una
sustancia rica en carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y
un porcentaje elevado de fósforo. A esta sustancia se le llamó en
un principio nucleína, por encontrarse en el núcleo.
Años mas tarde, se fragmentó esta nucleína, y se
separó un componente proteico y un grupo prostético, este
último, por ser acido, se le llamó acido nucleico.
En los años 30, Kossel comprobó que tenían una estructura
bastante compleja.
En 1953, James Watson y Francis Crick, descubrieron la estructura
tridimensional de uno de estos acidos, concretamente del acido
desoxirribonucleico (ADN).
¿Dónde se Encuentran los Genes?
En el ADN (acido desoxirribonucleico) se encuentran los genes que portan
toda la información genética de un organismo completo, es decir,
tienen el control de la herencia. El ADN es una molécula bastante
compleja, que esta compuesta por cuatro tipos de bases llamadas
nucleótidos, que, a su vez, estan formados por tres partes: una
base nitrogenada, un azúcar denominado desoxirribosa y un grupo fosfato.
Trabajos que Dilucidaron la Naturaleza del Material Hereditario
Experimentos de Griffith
El experimento de Griffith, llevado a cabo en 1928 por Frederick Griffith, fue
uno de los primeros experimentos que mostró que las bacterias eran
capaces de transferir informacióngenética mediante un proceso
llamado transformación.
En 1928, el microbiólogo Fred Griffith, que investigaba varias cepas de
neumococo (Streptococcus pneumoniae), inyectó en ratones la cepa S y la
cepa R de la bacteria. La cepa S era dañina, mientras que la rugosa (R),
no lo era ya que la cepa S se cubre a si misma con una capsula de
polisacarido que la protege del sistema inmune del ser que ha sido
infectado, resultando en la muerte de este, mientras que la cepa R no contiene
esa capsula protectora es derrotada por el sistema inmunológico.
Cuando, inactiva por calor, la cepa S era inyectada, no había secuelas y
el ratón vivía. Sorprendentemente, al combinar cepa R (no letal),
con cepa S inactivada por calor (no letal), el ratón murió.
Ademas, Griffith encontró células de cepa S vivas. En
apariencia la cepa R se convirtió en cepa S. Este hallazgo no se pudo
explicar, hasta que en 1944 Avery, Mc Leod, y Mc Carty, cultivaron cepa S y:
* Produjeron extracto de lisado de células (extracto libre de
células).
* Luego que los lípidos, proteínas y polisacaridos se removieron,
el estreptococo aún conservó su capacidad de replicar su ADN e
introducirlo en neumococo R.
La inactivación por calor de Griffith habría dejado intacto el
ADN de los cromosomas de las bacterias, que era el causante de la
formación del gen S, y podía ser liberado por las células
destruidas e implantarse en cultivos sucesivos de cepa R.
Experimentos de Avery, MacLeody McCarty
Avery, MacLeod y McCarty, quienes repitieron los experimentos de transformación
de Griffith y caracterizaron químicamente el principìo
transformante. Avery, MacLeod, y McCarty demostraron que el DNA procedente de
una cepa virulenta lisa de neumococo pudo transformar una cepa rugosa en la
variedad lisa. Éste es el primer experimento que concluye que el DNA es
el material genético.
Experimentos de Chargaff
Esta idea fue desechada en 1950 por el científico checo Erwin Chargaff
del Instituto Rockefeller, quien analizó en detalle la
composición de bases del ADN extraído de diferentes organismos.
Llegó a la sorprendente conclusión de que las cuatro bases
nitrogenadas no se encontraban en proporciones exactamente iguales en las
distintas especies, lo cual sugirió que el ADN no debía ser tan
monótono como se pensaba.
Chargaff demostró que, independientemente del origen del ADN, la
proporción de purinas era igual a la de pirimidinas. Es decir, adenina
(A) aparecía con tanta frecuencia como la timina (T) y la guanina (G),
con tanta frecuencia como la citosina (C). Había dos juegos de
equivalencias, A y T por un lado y G y C por otro.
Este resultado reflejaba por primera vez un aspecto estructural del ADN.
Indicaba que, independientemente de la composición de A o de G en un
ADN, siempre la concentración de A es igual a la de T y la de C igual a
la de G. Sin embargo, en aquel momento Chargaff no sospechó las
implicancias que podían tenerestas reglas, denominadas mas tarde
'reglas de Chargaff', en el esclarecimiento de la estructura del ADN
Experimentos de Hershey y Chase
En 1952 Alfred Hershey y Martha Chase realizaron una serie de experimentos para
confirmar que es el ADN la base del material genético (y no las
proteínas), en lo que se denominó el experimento de Hershey y
Chase. Si bien la existencia del ADN había sido conocida por los biólogos
desde 1869, en aquella época se había supuesto que eran las
proteínas las que portaban la información que determina la
herencia. En 1944 mediante el experimento de Avery-MacLeod-McCarty se tuvo por
primera vez algún indicio del rol que desempeña el ADN.
Método experimental
Hershey y Chase llevaron a cabo experimentos con el fago T2, un virus cuya
estructura había sido recientemente investigada mediante microscopio
electrónico. El fago consiste únicamente en una cubierta proteica
o capside que contiene su material genético, e infecta a una
bacteria cuando se adhiere a su membrana externa, inyecta dicho material y le
deja acoplado el capside. Como consecuencia, el sistema genético
de la bacteria reproduce el virus.
En un primer experimento, marcaron el ADN de los fagos con el isótopo
radiactivo fósforo-32 (P-32). El ADN contiene fósforo, a
diferencia de los 20 aminoacidos que forman las proteínas.
Dejaron que los fagos del cultivo infectaran a las bacterias Escherichia coli y
posteriormente retiraron las cubiertas proteicas de lascélulas
infectadas mediante una licuadora y una centrífuga. Hallaron que el
indicador radiactivo era visible sólo en las células bacterianas,
y no en las cubiertas proteicas.
En un segundo experimento, marcaron los fagos con el isótopo azufre-35
(S-35). Los aminoacidos cisteína y metionina contienen azufre, a
diferencia del ADN. Tras la separación, se halló que el indicador
estaba presente en las cubiertas proteicas, pero no en las bacterias infectadas,
con lo que se confirmó que es el material genético lo que infecta
a las bacterias.
Hershey y Chase encontraron que el S-35 queda fuera de la célula
mientras que el P-32 se lo encontraba en el interior, indicando que el ADN era
el soporte físico del material hereditario.
Composición Química de los Acidos Nucleicos
Estan constituidos por un azúcar que es una pentosa, la cual
puede ser: ribosa en el caso del ARN y la desoxirribosa en el caso del ADN.
Otro componente de su estructura son las bases nitrogenadas, estas pueden ser:y
El Acido Ribonucleico (ARN)
El acido ribonucleico (ARN o RNA) es un acido nucleico formado
por una cadena de ribonucleótidos. Esta presente tanto en las
células procariotas como en las eucariotas, y es el único
material genético de ciertos virus (virus ARN). El ARN celular es lineal
y de hebra sencilla, pero en el genoma de algunos virus es de doble hebra.
En los organismos celulares, es la molécula que dirige las etapas
intermedias de la síntesis proteica. El ADN nopuede actuar solo, y se
vale del ARN para transferir esta información vital durante la
síntesis de proteínas (producción de las proteínas
que necesita la célula para sus actividades y su desarrollo). Muchos
tipos de ARN tienen actividad reguladora o catalítica,
mostrandose mucho mas versatiles que el ADN.
Tipos de ARN
El ARN mensajero (ARNm) es el tipo de ARN que lleva la información del
ADN a los ribosomas, el lugar de la síntesis de proteínas. La
secuencia de nucleótidos del ARNm determina la secuencia de
aminoacidos de la proteína. Por ello, el ARNm es denominado ARN
codificante.
No obstante, muchos ARN no codifican proteínas, y reciben el nombre de
ARN no codificantes; se originan a partir de gens propios (genes ARN o son los
intrones rechazados durante el proceso de splicing. Son ARN no codificantes el
ARN de transferencia (ARNt) y el ARN ribosómico (ARNr) que son elementos
fundamentales en el proceso de traducción, y diversos tipos de ARN
reguladores.
Ciertos ARN, denominados ribozimas, son capaces de catalizar reacciones
químicas como cortar y unir otras moléculas de ARN, o formar
enlaces paptídicos entre aminoacidos en el ribosoma durante la
síntesis de proteínas.
ARN implicados en la síntesis de proteínas
* ARN mensajero. El ARN mensajero (ARNm o RNAm) lleva la información
sobre la secuencia de aminoacidos de la proteína desde el ADN,
lugar en que esta inscrita, hasta el ribosoma, lugar en que se
sintetizan las proteínas dela célula. Es, por tanto, una
molécula intermediaria entre el ADN y la proteína y el apelativo
de 'menasajero' es del todo descriptivo. En eucariotas, el ARNm se
sintetiza en el nucleoplasma del núcleo celular y accede al citosol,
donde se hallan los ribosomas, a través de los pors de la envoltura
nuclear.
* ARN de transferencia. Los ARN de transferencia (ARNt o tRNA) son cortos polímeros
de unos 80 nucleótidos que transfiere un aminoacido
específico al polipéptido en crecimiento; se unen a lugares
específicos del ribosoma durante la traducción. Tienen un sitio
específico para la fijación del aminoacido (extremo 3') y
un anticodón formado por un triplete de nucleótidos que se une al
codón complementario del ARNm mediante puentes de hidrógeno.
* ARN ribosómico. El ARN ribosómico (ARNr o RNAr) se halla
combinado con proteínas para formar los ribosomas, donde representa unas
2/3 partes de los mismos. En procariotas, las subunidad mayor del ribosoma
contiene dos moléculas de ARNr y la subunidad menor, una. En los
eucariotas, la subunidad mayor contiene tres moléculas de ARNr y la
menor, una. En ambos casos, sobre el armazón constituido por los ARNr se
asocian proteínas específicas. El ARNr es muy abundante y
representa el 80% del ARN hallado en el citoplasma de las células
eucariotas. Los ARN ribosómicos son el componente catalítico de
los ribosomas; se encargan de crear los enlaces peptídicos entre los
aminoacidos del polipéptido enformación durante la
síntesis de proteínas; actúan, pues, como ribozimas.
ARN reguladores
Muchos tipos de ARN regulan la expresión génica gracias a que son
complementarios de regiones específicas del ARNm o de genes del ADN.
* ARN de interferencia. Los ARN interferentes (ARNi o iRNA) son
moléculas de ARN que suprimen la expresión de genes
específicos mediante mecanismos conocidos globalmente como
ribointerferencia o interferencia por ARN. Los ARN interferentes son
moléculas pequeñas (de 20 a 25 nucléotidos) que se generan
por fragmentación de precursores mas largos. Se pueden clasificar
en tres grandes grupos:
* Micro ARN. Los micro ARN (ARNmi) son cadenas cortas de 21 ó 22
nucleótidos hallados en células eucariotas que se generan a
partir de precursores específicos codificados en el genoma. Al
transcribirse, se pliegan en horquillas intramoleculares y luego se unen a
enzimas formando un complejo efector que puede bloquear la traducción
del ARNm o acelerar su degradación comenzando por la eliminación
enzimatica de la cola poli A.
* ARN interferente pequeño. Los ARN interferentes pequeño (ARNip
o siARN), formados por 20-25 nucleótidos, se producen con frecuencia por
rotura de ARN virales, pero pueden ser también de origen
endógeno. Tras la transcripción se ensambla en un complejo
proteico denominado RISC (RNA-induced silencing complex) que identifica el ARNm
complementario que es cortado en dos mitades que son degradadas por
lamaquinaria celular, bloquean así la expresión del gen.
* ARN asociados a Piwi. Los ARN asociados a Piwi son cadenas de 29-30
nucleótidos, propias de animales; se generan a partir de precursores
largos monocatenarios, en un proceso que es independiente de Drosha y Dicer.
Estos ARN pequeños se asocian con una subfamilia de las proteínas
'Argonauta' denominada proteínas Piwi. Son activos las
células de la línea germinal; se cree que son un sistema
defensivo contra los transposones y que juegan algún papel en la
gametogénesis.
* ARN antisentido. Un ARN antisentido es la hebra complementaria (no
codificadora) de un hebra ARNm (codificadora). La mayoría inhiben genes,
pero unos pocos activan la transcripción. El ARN antisentido se aparea
con su ARNm complementario formande una molécula de doble hebra que no
puede traducirse y es degradada enzimaticamente. La introducción
de un transgen codificante para un ARNm antisentido es una técnica usada
para bloquear la expresión de un gen de interés. Un mARN
antisentido marcado radioactivamente puede usarse para mostrar el nivel de
transcripción de genes en varios tipos de células. Algunos tipos
estructurales antisentidos son experimentales, ya que se usan como terapia
antisentido.
* ARN largo no codificante. Muchos ARN largos no codificantes (ARNnc largo o
long ncARN) regulan la expresión génica en eucariotas; uno de
ellos es el Xist que recubre uno de los dos cromosomas X en las hembars de
losmamíferos inactivandolo (corpúsculo de Barr).
* Riboswitch. Un riboswitch es una región del ARNm al cual pueden unirse
pequeñas moléculas señalizadoras que afectan la actividad
del gen. Por tanto, un ARNm que contenga un riboswitch esta directamente
implicado en la regulación de su propia actividad que depende de la
presencia o ausencia de la molécula señalizadora. Tales riboswitchs
se hallan en la región no traducida 5' (5'-UTR), situada antes del
codón de inicio (AUG), y/o en la región no traducida 3' (3'-UTR),
también llamada secuancia de arrastre, situada entre el codón de
terminación (UAG, UAA o UGA) y la cola poli A.
ADN no Nuclear
El ADN no esta confinado exclusivamente a los cromosomas, ya que se ha
encontrado en las mitocondrias (células eucariotas animales), en los
cloroplastos (células eucariotas vegetales), en los plasmidos
(células procariotas) y en los virus.
El ADN de las Mitocondrias y de los Cloroplastos
Las mitocondrias y los cloroplastos son organulos celulares
autónomos, ambos poseen ADN que es capaz de replicarse, transcribirse y
traducirse independientemente del nuclear. A la vista de este hecho,
podríamos pensar, si esos genes contenidos en el cromosoma de
mitocondrias y cloroplastos, tuvieran o no influencia en el fenotipo de un
individuo. De ser así, su herencia no sería de tipo mendeliana.
Los genes nucleares segregan en meiosis, pero los genes de estos organulos
segregaran en mitosis, cuando se produce la distribuciónal azar de los
organulos celulares. En la fecundación la aportación
citoplasmica del gameto masculino es muy pequeña, sí no
nula, por lo tanto hemos de pensar que los individuos reciben sólo
aportación de mitocondrias y cloroplastos vía materna, es decir
sólo recibe los genes extranucleares de la madre.
Los Plasmidos
Los plasmidos (también llamados plasmidios) son moléculas
de ADN extracromosómico circular o lineal que se replican y transcriben
independientes del ADN cromosómico. Estan presentes normalmente
en bacterias, y en algunas ocasiones en organismos eucariotas como las
levaduras. Su tamaño varía desde 1 a 250 kb. El número de
plasmidos puede variar, dependiendo de su tipo, desde una sola copia
hasta algunos cientos por célula. El término plasmido fue
presentado por primera vez por el biólogo molecular norteamericano
Joshua Lederberg en 1952.
Los Virus
Un virus es una entidad biológica que para replicarse necesita de una
célula huésped. Cada partícula de virus o virión es
un agente potencialmente patógeno compuesto por una capside (o
capsida) de proteínas que envuelve al acido
nucléico, que puede ser ADN o ARN. La forma de la capside puede
ser sencilla, típicamente de tipo helicoidal o icosaédrica
(poliédrica o casi esférica), o compuesta, típicamente
comprendiendo una cabeza y una cola. Esta estructura puede, a su vez, estar
rodeada por la envoltura vírica, una capa lipídica con diferentes
proteínas, dependiendo del virus.