UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS Y TECNOLOGICAS
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
1ER SEMESTRE
BIOLOGIA I



MICROSCOPIA I Y II






VALLEDUPAR – CESAR


Microscopia I y II

Objetivos

-General
Conocer los principios ópticos, manejo y cuidado del microscopio, adquiriendo habilidades y destreza en el uso de este y utilizar el método de medición indirecta con base en el diámetro del campo óptico. Saber sobre la historia del microscopio y tener claros los conceptos básicos de la microscopia.

-Específicos
1. ubicar los componentes mecánicos y ópticos del microscopio y así mismo reconocer las demás partes de este. Tener conocimiento sobre el objetivo de inmersión, y la función del aceite de cedro en este.

2. desarrollar habilidades para utilizar, enfocar y medir indirectamente en el microscopio, realizando montajes húmedos y conocer los diversos tipos de microscopios.




Introducción

A lo largo de los años el hombre ha tenido ansias de conocer más de lo que se puede observar, saber que hay mas allá de lo “a simple vista” queriendo estudiar lo lejano y lo más cercano, así mismo ver la composición de las cosas utilizando instrumentos adecuados, según su necesidad de conocimiento y que le han permitido acceder allí donde los sentidos no podrían penetrar.
Esto lo hizo posible el microscopio, conocer mundos de dimensiones infinitas, entre ellas la célula (Unidad fundamental de los organismosvivos).

Los microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formación de imágenes ópticas aumentadas a través de lentes convexos, permiten la observación de pequeños detalles de una muestra dada que a simple vista no se percibirían.


Procedimiento

Realizar Montajes Húmedos

Luego de hacer la identificación de cada sistema del microscopio procedemos a la parte práctica, en donde utilizamos los siguientes materiales

a) Biológicos: Letra “e”, hebra de hilos de colores cruzados “uno blanco y uno negro” papel milimetrado y recorte de revista color verde.
b) Equipos: Microscopio, Tijeras
c) agua
d) vidriería: láminas, laminillas.



Resultados

Por conocimientos base sabemos que el microscopio nos permite observar de manera más detallada las características de una determinada muestra. Se Pudo apreciar diminutivas cosas que no se podían ver a simple vista, como en el caso de la letra “e” pues en esta se veían distintos colores como el verde, fucsia y azul claro, pero que en realidad fuera de microscopio solo era de fondo negro y la letra blanca, estos nos sucedió también con los demás montajes, pues pudimos obsérvalos “como más de cerca”. Todos estos montajes se analizaron con diferentes tipos de aumento que posee dicho microscopio 4x, 10x, 40x.


La letra “e”
4x 10x40x


La hoja milimetrada
4x 10x 40x


Hilos de Colores cruzados
4x 10x 40x



Pedazo de Revista de Color Verde
4x 10x 40x


Análisis de Resultados

-La letra “e”… Realizado por Angie Guzmán
Con la ayuda de un gotero colocamos una gota de agua limpia en la lamina, luego colocamos con cuidado la letra “e” adicionamos otra gota de agua y lo cubrimos con la laminilla, procedimos a colocar la muestra en la platina del microscopio, subimos el macrometrico hasta que pudimos observar algo y le dimos nitidez con el micrométrico y se observo que la letra no estaba como la habíamos colocado, sino que ésta se veía por los oculares invertida, de tal forma que la letra estaba al revés. Se podía apreciar completamente la letra y ocupaba cierta parte del campo. Cuando pasamos al objetivo de 10x y movimos solamente micrométrico, aquí pudimos apreciar la parte central de la letra “e” invertida, notándose el agua y cada uno de los colores que la comprendían en el fondo negro, y así en la parte blanca más luminosa. Luego pasamos a el objetivo de 40x en este ya no se podía apreciar completamente la letra “e” sino solo una parte de ella en donde se distinguían los colores claramente yunas fisuras blancas.

Nuestra pregunta fue la siguiente, sPor qué la letra en el microscopio se veía al revés? Dos lentes convexas bastan para construir un microscopio. Cada lente hace converger los rayos luminosos que la atraviesan. El objetivo forma una imagen real, aumentada e invertida. El principal causante de este efecto (letra invertida) es un prisma de cristal que se encuentra en el interior del microscopio (a la altura de la base ocular), la función de este prisma es concentrar la luz o imagen aumentada por los objetivos y dirigirlas hacia los oculares. Se dice que la imagen es real porque los rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la imagen. La imagen observada por los lentes oculares, que actúa como lupa, allí la imagen se vuelve virtual. Actualmente existen microscopio que tienen un segundo prisma que reinvierte la imagen para corregir esta inversión, es decir para que la letra se pueda apreciar cómo se coloca.

Microsoft Encarta, 2011

-La Hoja milimetrada… Realizado por Romario Ospino
Pudimos observar que en el lente de 4x la muestra la podíamos ver pero no tan cerca como para analizarla totalmente como tendría que ser, ya que no es que aumento que necesitaríamos para ver al objetivo Al pasar al de 10x vemos al objetivo más cerca ya que fue aumentado y la imagen es más clara y nos damos cuenta la diferencia de tamaños tanto como del anterior aumento que fue de 4x y obviamente el del ojo humano Y por ultimo vemos el de 40x y observamos al cuadro marcado individual, en los anteriores podíamos ver otros cuadros muy similares por esa razónllegamos a unos de los de mas aumento e identificamos los trazos de lápiz y otras características.

-Los Hilos Cruzados… Realizado por Andrés Rivera
Pasamos a observar ahora el par de hilos de colores Cuando pasamos a observar estos objetos comenzamos con 4x. Observamos que de los dos hilos salen un poco de hilos mas que son los que lo conforman en cambio cuando pasamos a 10x vemos los objetos un poco mas Grande y con el micrómetro le ponemos nitidez para ver el objeto un poco mejor, observamos el poco de hilos que se unen para formar uno solo Después pasamos a 40x hay Observamos la muestra más Grande Y le ponemos nitidez hay Observamos mejor la muestra, nos damos cuenta de la gran diferencia de los lentes 4x, 10x y 40x

-Recorte de Revista… Realizado por Marolin Mariano
El resultado de la observación del papel de revista pasa por varios procesos.
El primero es tener en cuenta todo lo referente al microscopio ya que este nos ayudara a saber cómo utilizarlo y también como mirar y obtener un análisis completo de nuestra muestra, en este caso el papel de revista.
Se coloca la muestra en la platina esto para que se pueda ubicar en el enfoque ya que la platina está ubicada en el carro a la muestra se le adiciona unas gotas de agua esto porque el agua tiene elevada fuerza de cohesión y también actúa como aclarante para la muestra. Al poner nuestra muestra en el microscopio subimos el macrometrico con el lente de 4x, lo subimos para ver la muestra mejor y movemos el micrométrico para darle nitidez, el lente de 4x es un lente convexo al acercarlo se nota de inmediato uncambio trascendental por el aumento. Al ver la muestra vemos como se admira puntos de colores diferentes unidos un a otros. En el de 10x este también es un lente convexo llegamos a este lente moviendo el revolver al tener el lente allí miramos y movemos el micrométrico para darle nitidez, observamos que los puntos de colores se han agrandado mucho mas y con una apariencia de separación uno de otros, allí más o menos distinguimos los colores que lo componen. En el de 40x también es un lente convexo se mueve nuevamente el revólver por esta razón la muestra se ha agrandado mas ya que este lente de 40x es el más grande de los que no son de inmersión por esta razón hasta allí llega la observación de la muestra del papel de revista, ya aquí se puede notar la separación de los puntos de colores adquiriendo así como formas de puntos separados en líneas rectas.

Post – Laboratorio

Historia del Microscopio

El microscopio se descubrió por primera vez en el siglo xvi pero todos los dibujos del periodo indican arreglos pocos prácticos de las lentes. Fueron probablemente Cornelius Drebbel y el pulidor de gafas Hans Janssen y su hijo el también óptico, Zacharias Janssen de Middleburg, Holanda, quienes construyeron hacia 1590 el primer microscopio compuesto y probablemente también el telescopio. (ver 1) Este primer microscopio tenía una lente bicóncava (ocular) y otra biconvexa (objetivo) y con él se lograban 60 aumentos. Las lentes no tenían todavía corrección cromática ni esférica, por lo que la resolución era muy limitada. El griego Demesianos, miembro de la Academia dei Lincei, dioen 1614 a esta nueva forma de lente el nombre de microscopio, denominación que fue divulgada por el médico alemán Johann Faber. Por aquel tiempo se entendía por ese nombre incluso las lupas sencillas, que en las observaciones con aumento desempeñaron al principio un papel más importante que los microscopios compuestos.
En 1611, Johannes Kepler demostró las ventajas de una forma de microscopio que tenia lentes convexas tanto en el objetivo como en el ocular. Esta se hizo de forma dominante del microscopio y fue mejorada más tarde con la adición de una tercera lente, la lente de campo. Un ocular diseñado por Christian Huygens que incorporaba tanto el ocular como la lente de campo en un solo montaje, se adopto rápidamente como el ocular estándar para la observación microscópica.
Los desarrollos posteriores del microscopio compuesto durante los siglos xvii y xviii ocurrieron sobre todo en Inglaterra e Italia, aunque siguiendo trayectorias un poco distintas. La mayoría de los instrumentos italianos se diseñaban para examinar objetos opacos bajo la luz reflejada. Eustaquio Divini, diseñador italiano de microscopios, introdujo la idea de usar dos lentes planoconvexas para formar un ocular que permitiera alguna corrección de la aberración. Muchas innovaciones mecánicas fueron desarrolladas por los micróscopistas italianos incluyendo la dotación de los tubos con mecanismo de rosca para enfocar y el uso de resortes para sostener las muestras.
En el siglo xvii aparecieron, en las Academias recién fundadas, grupos de investigación que inmediatamente reconocieron la importancia de estenuevo instrumento. La Royal Society tuvo sus principios pulidores de lentes para la fabricación de microscopios y telescopios. Descartes y Leibnitz se pronunciaron con pasión a favor de la utilización del microscopio Esto fue necesario ya que también había adversarios del nuevo invento.
Antonio Van Leeuwenhoek, metódico experimentador y comerciante que a partir de 1665 fabrico microscopios propios que llegaban hasta unos 270 aumentos y los cuales no fueron superados hasta el siglo xviii. Llego a fabricar más de 400 lentes a lo largo de su vida y al morir dejo una muestra de las mismas a la Royal Society.
El microscopio lleno el espacio con organismos microcelulares, cuya existencia era tan increíble que, de no haber sido por las investigaciones de Spallanzani, hubiera quedado fuera de la esfera de las indagaciones serias durante más de un siglo.
En el año 1665 el físico ingles Rober Hooke construyo un microscopio compuesto con enfoques macro y micro. Descubrió unas pequeñas celdillas en cortes de corcho, a las que denomino células, con su ayuda se empezó a conocer las estructuras de las plantas y a deducir las funciones de cada una de sus partes. Hooke mejoró los microscopios de varias maneras y empezó en Inglaterra una tendencia hacia el desarrollo de instrumentos elegantes, que incorporaban muchos avances mecánicos sin embargo los ópticos ingles continuaron utilizando lentes simples que sufrían de aberraciones esférica y cromática
En 1712, Hertel invento el espejo de iluminación. De 1730 a 1750 los ingleses Culpeper, Sterrop, Scarlett y Cuff desarrollaron es estribogiratorio. Jan Infenhouusz descubrió la técnica de los cubre objetos en 1784.
Se utilizaba entonces tanto la luz incidente como la transmitida, se hicieron grandes mejoras y diseños nuevos de objetivos para microscopios. Asi le fue posible al óptico Charles Chevalier construir en 1824 excelentes lentes acromáticas.
La aparición de nuevas variedades de vidrios ópticos impulso el desarrollo continuo de los microscopios, y se hicieron grandes avances en la comprensión de la geometría óptica de la formación de la imagen. El científico ingles Joseph Jackson Lister, en 1830, publico un trabajo que describía un enfoque teórico sobre el diseño completo de objetivos de microscopio
Continuamente se iban añadiendo nuevas mejoras técnicas. En el año de 1872 Ernest Abbe desarrollo el sistema de iluminación que lleva su nombre, con condensador enfocable y diafragma iris. En 1873 Abbe relaciono los conceptos de Biddell con la habilidad del microscopio para resolver la estructura periódica fina en los objetos microscópicos. Asi mismo la teoría moderna del microscopio, que incluye los efectos de interferencia de la luz en la determinación del límite de resolución del microscopio. Abbe relaciono correctamente el límite de resolución óptico con la resolución de la longitud de la luz y la apertura numérica del objetivo, y explico la relación entre el tipo de la luz que ilumina el objeto y la apariencia de la imagen. Abbe también invento el objetivo de inmersión, en el cual la resolución se mejora por inmersión del objeto de un medio con alto índice de refracción. Ya en 1827, Giovanni Bautista Amicihabían utilizado el método de inmersión en el agua. Abbe y Zeiss introdujeron el aceite de cedro.
Desde 1870 las mejoras en el microscopio compuesto fueron principalmente en el aspecto mecánico, con poco avance en la óptica. Sin embargo todo esto sento las bases para las formidables avances logrados en el sigo xx en la construcción de múltiples y diversos tipos de microscopios.
El microscopio binocular estereoscópico diseñado en 1913
El microscopio metalúrgico y microscopio de fluorescencia aparecido en 1913
El microscopio de contraste óptico diseñado en 1934
Desde la década de los 1930 los microscopios de fase y de interferencia, el microscopio electrónico, el de rayos x todos ellos basados en los principios de formación de la imagen que se han establecidos firmemente como instrumentos de investigación.

Anexos


Microscopio compuesto antiguo microscopio Antiguo microscopio Antiguo




Algunos Descubrimientos en la historia de la microscopia óptica


1611 Kepler sugirió una manera de construir un microscopio compuesto.
1655 Hooke utilizo un microscopio compuesto para descubrir unas pequeñas celdillas en cortes de corcho, a las que denomino “células”.
1674 Leeuwenhoek informo de su descubrimiento de los protozoos. Nueve años más tarde observo bacterias por primera vez.
1833 Brow publico sus observaciones microscópicas de las orquídeas y descubrió claramente el núcleo celular.
1838 Schleiden y Schwann propusieron la teoría celular, afirmando que la célula nucleada es la unidad estructural yfuncional de las plantas y de los animales.
1857 Kolliker describió las mitocondrias de las células musculares.
1876 Abbe analizo los efectos de la difracción en la formación de la imagen en el microscopio y mostro la manera de optimizar el diseño de los microscopios.
1879 Flemming describió con gran claridad el compuesto de los cromosomas durante la mitosis de las células animales.
1881 Retzius describió muchos tejidos animales con una precisión que todavía no ha sido superada por ningún especialista de microscopia óptica. En las dos décadas siguientes tanto él como Cajal y otros histólogos diseñaron métodos de tinción y establecieron las bases de la anatomía microscópica.
1882 Koch utilizo colorantes de anilia para teñir microorganismos e identifico las bacterias que causan la tuberculosis y el cólera. En las dos décadas siguientes otros bacteriólogos como Klebs y Pasteur identificaron los agentes causantes de otras muchas enfermedades, examinando al microscopio preparaciones teñidas.
1886 Zeis construyo una serie de lentes, siguiendo las leyes de Abbe, que permitieron a los especialistas en microscopia la resolución de estructuras situadas en los límites teóricos de la resolución de la luz visible.
1898 Golgi observó y descubrió por primera vez el complejo de golgi, impregnando las células con nitrato de plata.
1924 Lacassagne y colaboradores desarrollaron la primer técnica autorradio grafica para localizar el polonio radioactivo en muestras biológicas.
1930 Lebedeff diseño y construyo el primer microscopio de contraste interferencial. En 1932 Zernicke invento elmicroscopio de contraste de fases. Estos adelantos permitieron observar por primera vez en detalle células vivas no teñidas.
1941 Coons utilizo anticuerpos acoplados a colorantes fluorescentes para detectar antígenos celulares.
1952 Nomarski ideó y patentó el sistema de contraste de contraste interferencial para el microscopio óptico, que aún lleva su nombre.
1981 Allen e Inoué perfeccionaron la microscopia óptica de contraste de video-amplificada.
1988 se generaliza el uso de microscopios de rastreo confocal.



-Porque razón el objetivo de inmersión debe sumergirse en un liquido especial (aceite de cedro) para poder observar la imagen del microscopio.

La función del aceite de cedro es darle nitidez, corregir el error por difracción, aumentar la resolución y el campo visual a la muestra que se está observando, en el microscopio con el objetivo de 100x que es el objetivo de inmersión, es especial debido a su viscosidad y se usa aplicando una gota entre el objetivo y la muestra. Este aceite tiene aproximadamente el mismo índice de refracción que el vidrio. Mediante este aceite se elimina casi completamente la desviación de los rayos de la luz y se aumenta considerablemente la eficacia de los objetivos en los microscopios.



-Cuando equivalen medidas.

Micrómetro= um Milímetro= mm
Nanómetro= nm Picómetro= Pm

Una Unidad de medida es una cantidad estandarizada de una determinada magnitud física. Para determinarla se emplea el Sistema Internacional de Unidades (SI) también conocido como sistema métrico. Este sistema se originó a partir del antiguosistema métrico decimal mks (metro-kilogramos-segundos).

La Longitud es una magnitud creada para medir la distancia entre dos puntos y su unidad es el metro.

-El Micrómetro (µm) es una unidad de longitud equivalente a una millonésima parte de un metro, abreviado µ (plural latino: micra) también conocido como micrón.
1.0000 µm, 10-6 metros

-El Nanómetro: (nm) es la unidad de longitud que equivale a una milmillonésima
Parte de un metro. Utilizada además para medir las longitudes de onda de las radiaciones electromagnéticas, la luz entre ellas.
1.000.0 nm, 10-9 metros

-El Milímetro: (mm) es la unidad de longitud, es el tercer submúltiplo del metro y equivale a la milésima parte de él.
0.0010000 mm, 10-3 metros

-El Picómetro: (pm) es una unidad de longitud que equivale a una billonésima parte de un metro
1.000.000 pm 10-12 metros



-Porque es importante saber el tamaño de las dimensiones de un organismo microscópico.

Para poder estudiar, básicamente no se puede estudiar y analizar algo que no se puede ver, ya de ahí, para conocer su morfología, como se mueve, que reacciones presenta ante estímulos físicos y químicos, también para conocer datos de su ecología, como la abundancia, como interactúa con otros organismos, etc.









Conclusión


Como grupo concluimos que este trabajo de microscopia I y II nos muestra muy clara, directa y fácilmente todo lo referente al microscopio, los tipos de microscopio, sus partes, para que sirven y su origen. También analizamos las imágenes las observadas con los lentes de 4x, 10x, 40x.
Todo elproceso que se realizo detallando claramente los pasos de cada muestra (la letra e, papel de revista, punto en hoja de milimetrado, hilos). En la historia nombramos Algunos descubrimientos de la microscopia óptica ya que fueron un paso grandioso para seguir desarrollando el mundo científico, tomamos en cuenta las equivalencias de las medidas y los tamaños de un organismo microscópico en el microscopio. Este trabajo reunió investigación de libros y fuentes de internet que utilizamos para el mejor aprovechamiento de la temática y nos puede servir para el mejor desempeño en el microscopio.






























Bibliografía


De la técnica a la modernidad, Editorial Universidad de Antioquia, Asdrúbal Valencia Giraldo, El microscopio página 76


Biología molecular de la célula, ediciones Omega, tercera edición, Bruce Alberts como se estudian las células capitulo 4
https://books.google.com.