Universidad de Santiago de Chile
Facultad de Química y Biología
Departamento de Química

Grupo
Patricia Arenas R.
Samanta Elgueta G.
Jeinsy Miranda F.

Profesor:
Rubén Pastene

Fecha de realización:
29 de Octubre 2007

Índice:

Paginas

• Introducción

• Actividad Nº 1

• Actividad Nº 2

• Actividad Nº 3

• Cuestionario

• Conclusiones

• Referencias

Introducción

En este laboratorio se realizara la separación de líquidos inmiscibles.
Las actividades consisten en la extracción de clorofila de las hojas mediante solventes, la separación de clorofila y xantofila, y la obtención de los espectros de absorción de la clorofila.

En un primer caso mediante un embudo de decantación se obtuvo clorofila combinada con acetona. La clorofila es el pigmento de las plantas, le proporciona su color verde y es fundamental para el proceso de la fotosíntesis. La obtención de es interesante para el estudio y conocimiento de las propiedades de las plantas.
En la segunda actividad se separan dos pigmento vegetales

Parte Experimental

Actividad 1: Extracción de la Clorofila

Materiales

- Acetona al 80% con agua.
- Trozos de hojas
- Balanza
- Mortero
- Embudo de filtración
- Algodón
- Matraz aforado de 25mL.
- Vidrio reloj.
- Papel aluminio
- Embudo de decantación.

Procedimiento

Se preparan 50mL. de una mezcla de acetona al 80% con agua.
Los trozos de hojas se pesan en una balanza con un vidrio reloj hasta conseguir 0,1 gr.
Las hojas se trituran en el mortero y se añade un poco de acetona, este procedimiento se realiza hasta observar que el líquido va adoptando una coloración verde.
La disolución obtenida se filtra, se recoge en un matraz aforado y este se cubre con papel aluminio.
Se vuelve a agregar acetona a las hojas en el mortero, se vuelve a triturar, filtrar y añadir almatraz aforado. Esta operación se repite hasta que las hojas pierdan por completo su color verde.
Se enrasa la disolución del matraz aforado con acetona.

Resultados

Se obtuvo una muestra A, la cual esta formada por clorofila y acetona.

Analisis de los resultados

Actividad 2: Separación de Clorofila y la Xantofila por extracción

Materiales:

- 15mL. de Tolueno
- Embudo de decantación de 100mL.
- 2 Matraz Erlenmeyer de 100mL.
- Disolución anterior.

Procedimiento

Se toman 10mL. de la disolución anterior (muestra A), adicionando 15mL.de Tolueno. Esta mezcla es introducida en un embudo de decantación, en donde se debe agitar varias veces y dejar que se separe la fase acetónica con clorofila de la toluénica, la cual contiene la xantofila y el resto de los componentes como carotenoides, fenoles, etc.
La fase toluénica queda en la parte inferior del embudo. Se abre la llave del embudo, expulsando la fase toluénica y una pequeña parte de la fase acetónica, en un matraz erlenmeyer.
La disolución de la acetona con clorofila se vierte en otro matraz erlenmeyer (muestra B

Resultados:

Analisis de los resultados:

Actividad Nº 3: Medición de las absorvancias (Espectros de absorción)

Materiales:

- Espectrofotómetro de absorción
- Cubetas de polietileno

Procedimiento:

Las muestras A y B se agregan en las cubeta de polietileno.
Se miden las absorbancia a distintas longitudes de onda

Resultados

Al introducir la muestra A en el Espectrofotómetro de absorción se agrega una muestra patrón que en este caso es la acetona al 80% con agua.
Al introducir la muestra B en el Espectrofotómetro de absorción se agrega una muestra patrón que en este caso en el Tolueno.

|Longitud de onda |Muestra A |Muestra B |
|350 |
|360 |
|370 |
|380 |
|390 |
|400 |
|410 |
|420 |
|430 |
|440 |
|450 |
|460 |

Analisis de resultados

La clorofila (muestra A) absorbe la energía solar necesaria para iniciar el ciclo fotosintético de muchas plantas y bacterias. La principal propiedad físicoquímica reponsable de este hecho es la elevada absorbancia que presenta la clorofila en el intervalo de longitudes de onda entre 400 nm y 700 nm.
Existen dos tipos principales de clorofila, la clorofila a y la clorofila b, que se diferencian por la presencia de un grupo CH3 o CHO, respectivamente, en uno de los anillos C4N.
Este grupo funcional da lugar a espectro de absorción.
La clorofila a en disolución acetónica presenta maximos de absorción en aproximadamente 430 nm y 662 nm, mientras que la clorofila b los presenta en aproximadamente 453 nm y 642 nm

Conclusión

Cuestionario