Manual de Procedimientos de Laboratorio en Bioquímica Clínica y Control de Calidad
CALCIO
Generalidad
El calcio sérico representa aproximadamente el 1% del calcio total del organismo, la mayor parte del cual está contenida en los huesos y en los dientes. El calcio sérico se encuentra en equilibrio dinámico con los líquidos extracelulares.
En el suero, el calcio está presente en formas distintas: el 35-45%, ligado a las proteínas; el 5-6%, ligado a ácidos débiles y no disociable (citrato); y el restante, como calcio ionizado, muy importante como regulador en la excitación neuro-muscular y de la permeabilidad celular. El calcio cataliza también muchas reacciones enzimáticas e interviene en la coagulación de la sangre.
El calcio ligado a las proteínas y el no disociable son biológicamente inactivos. La absorción se realiza primero en el tracto del intestino delgado, en particular para la acción de la vitamina D, del pH intestinal y en relación con fosfato en la dieta. Es eliminado con las heces y la orina.

Indicaciones
La determinación se utiliza en el monitoreo del metabolismo del calcio. Se distinguen
Hipocalcemia debida a: Hipofuncionalidad de las paratiroides, escasa absorción por disminución de vitamina D, cirugía intestinal, pancreatitis, cirrosis, alcoholismo, insuficiencia crónica del riñón.
Hipercalcemia debida a:Hiperparatiroidismo, aumentada destrucción de los huesos, metástasis de los huesos, neoplasia de la mama, neoplasia de la próstata y de la tiroides, osteoporosis, leucemia, linfoma, morbo de Paget, aumentada absorción intestinal, gravidez.
Modalidad de solicitud
En rutina y/o emergencia.
Preparación del paciente
Ayuno en rutina. Existen pequeñas modificaciones circadianas de la calcemia.
Modalidad de toma de muestra
Ninguna particularidad.
Tipo de cristalería
La cristalería y cualquier recipiente que tenga contacto con la muestra debe ser previamente lavado con ácido para evitar contaminación por calcio. Los corchos, tapones de hule y tapas plásticas son fuentes de contaminación que deben +-evitarse.
Transporte
Se puede transportar a temperatura ambiente.
Conservación
Centrifugar y separar el suero, porque el prolongado contacto del suero con el coágulo puede disminuir los valores del calcio.
El calcio es estable 7 días a temperatura ambiente de 20-25oC, 3 semanas 2-4oC, y 8 meses a -20oC.
Verificación de la muestra Verificar que el registro de la toma de muestra esté correcto.
A) Registro
Escrito claramente.
B) Muestra
Idoneidad de la muestra: identificación y cantidad.
C) Centrifugación
Poner el tubo de ensayo en la centrífuga de modo balanceado, poner el reloj 5 minutos y centrifugar por 3000 r.p.m. Verificar laidoneidad del suero o plasma: ictericia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez. Señalar eventualmente en el resultado la no idoneidad de la muestra.
Metódicas de determinación
Fotometría de llama
El calcio a temperatura de llama emite dos bandas moleculares con picos a 556 y 626 nm., debidas al óxido.
Espectrometría de absorción atómica
Con flama área acetileno o protosido de asoto se puede medir con línea analítica a
422.7 nm.
Metódica colorimetría y procedimiento analítico
El calcio en suero se determina por reacción directa con o-cresolftaleína complexona. Este colorante forma un complejo violeta en presencia de calcio en medio alcalino. La 8-hidroxiquinolina elimina la interferencia producida por el magnesio.
Calcio + O-Cresolftaleína complexona medio alcalino
———————>
Calcio – Cresolftaleína complexona (color violeta).

Materiales
Guantes descartables no estériles
Tubos de ensayo 16 x 100 mm
Puntas de pipeta 10-50 ul
Puntas de pipeta 50-200 ul
Puntas de pipeta 200-1000 ul
Puntas de pipeta 1000-5000 ul
Centrífuga
Espectrofotómetro
Baño María
Reloj marcador
Pipetas automáticas 10-50 ul
Pipetas automáticas 50-200 ul
Pipetas automáticas 200-1000 ul
Pipetas automáticas 1000-5000 ul
Procedimiento
Seguir las instrucciones de la casa comercial.
Control de Calidad
Sedeberán usar sueros, control normal y patológico, en las mismas condiciones que las muestras.
Verificar el resultado
Si el valor del calcio es < 7.0 y/o ≥13.0 mg/dl., repetir la medida.
Si el valor del resultado repetido es el mismo, se puede entregar.
Si el valor del resultado repetido es diferente, procesar nuevamente la muestra utilizando un control patológico.
Con valores de calcio ≥de 16.0 mg/dl., repetir la medida, sea concentrada y diluida 1:2 con solución fisiológica con un control patológico.
Si la confrontación del valor concentrado está sobrepuesto al suero diluido y el control está dentro el rango establecido, se puede entregar el resultado.
Si el suero diluido no está en relación con el suero concentrado, diluir nuevamente la muestra 1:4, 1:8, 1:16 con solución fisiológica siempre usando el control patológico.
Para transformar los valores del calcio en calcio ionizado (Ca++) se usa la siguiente fórmula
(Ca tot mg/dl x 6) - (Prot. tot g/dl / 3)
Ca++ = __________ ______ ____ ______
Prot. tot g/dl + 6
Los valores de referencia del calcio ionizado son: 5.0 - 6.0 mg/dl
Notas sobre la metódica:
Linealidad
La metódica es lineal hasta 16 mg/dl.
Sensibilidad
La metódica tiene una sensibilidad de 0 mg/dl.
Especificidad
La metódica es específica para el calcio. Es necesario reducir la absorción deCO2 para evitar una reducción de la estabilidad de los reactivos y de la calibración.
Interferencias
En la práctica, no existe alguna interferencia significativa del suero.
La interferencia se puede presentar con
Hemólisis > de 10 g/l.
Bilirrubinas > de 60 mg/dl.
La lipemia > de 1000 mg/dl de triglicéridos.
Interferencias particulares pueden deberse a sustancias anticoagulantes o quelantes (EDTA, citrato, oxalato).
Valor de referencia
Neonato de edad hasta 10 días 8.6-10.2 mg/dl.
Neonatos niños de 10 días hasta 2 años 7.6-10.4 mg/dl.
Niños de 2 hasta 12 años de edad 9.0-11.0 mg/dl.
Adultos 8.8-11.0 mg/dl.
Criterio de validación
Comparar con otros parámetros del metabolismo: fósforo.
Comparar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio y cloro).
Comparar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea.
Comparar con parámetros de funcionalidad pancreática (amilasa, lipasa).
Controlar parámetros de funcionalidad de riñón (creatinina, clareamiento de la creatinina, proteinuria y densidad urinaria).
Controlar edad del paciente y eventual estado de gravidex.
Controlar eventual terapia diurética.
Modo de escribir los resultados
El calcio se escribe con una cifra decimal.
Comunicación de riesgo
Se tiene que comunicar inmediatamente con valores inferiores a 7.0 mg/dl y ≥12.0 mg/