OBJECTIUS
• Observació de fases de la mitosi en cèl · lules vegetals.
• Aprendre l'ús de tècniques d'observació microscópica i de tinció complexes.

MATERIAL NECESSARI

• Microscopi
• Portaobjectes
• Cobreobjectes
• Llanceta estèril
• Cubeta de tinció
• Agulla enmanegada
• Pinces
• Escuradents
• Flascó rentador
• Bunsen
• Tisores
• Paper de filtre
• Vas de precipitats
• Vidre de rellotge
• Orceína A
• Orceína B

DESCRIPCIÓ:
La mitosi és el procés clau de la divisió cel · lular. El material genètic prèviament duplicat s'organitza en cromosomes i es reparteix equitativament a les dues cèl · lules filles en formació. L'arrel de la ceba és un bon material per observar aquest procés, ja que en el meristema apical les cèl · lules es divideixen a gran velocitat, el que augmenta la probabilitat de detectar cèl · lules en mitosi.

Els cromosomes, com la majoria dels components cel · lulars, són invisibles al microscopi si no els apliquem una tinció específica. La orceína, colorant morat que usarem en aquest cas, està composta en realitat de dos components, que s'afegeixen en moments diferents. La orceína A estovales membranes cel · lulars i la orceína B completa el procés de tinció del material cromosòmic en adherir-se a aquestes estructures.

PROCEDIMENT
1. Tres o quatre dies abans de la sessió de laboratori has de fer créixer les arrels de la ceba. Per això, posa una ceba sobre un vas de precipitats amb aigua, subjecta amb dues o tres escuradents. Només la part inferior ha de quedar en contacte amb el aigua.
2. Un cop crescudes les arrels, talla amb les tisores la punta de l’arrel i després, uns 2-3 mm de l'extrem de les mateixes (aquí es troben les cèl · lules en divisió) i diposita-ho en un vidre de rellotge en què prèviament has abocat 2-3 ml de orceína A
3. Escalfa el vidre de rellotge a la flama de l'encenedor durant uns 8 minuts, fent suaus passades i evitant l'ebullició. Retira de la flama el vidre si observes vapors tènues. Evita que la orceína s'acosti a la vora del vidre, ja que es podria encendre al contacte amb la flama. Si la orceína s'evapora, afegeix unes gotes més. És molt important evitar que la mostra es cremi.

Como habíamos planteado, las constituciones de corte liberal han reconocido de una u otra forma este derecho a la libertad, y al hacerlo, de manera general, han seguido los siguientes postulados

1.
2. Los poderes públicos no sólo deben garantizar este derecho en abstracto, sino que les corresponde promover las condiciones para que la libertad del individuo y de los grupos en que se integra sea real y efectiva.
3. En aras de no perjudicar la libertad de cada uno, se prohíbe laarbitrariedad de los poderes públicos.

2. Que la actuación del ejecutivo al detener a alguien sea estrictamente provisional.
3. Que la actuación del legislativo signifique que se hayan previsto los casos y los procedimientos para privar a un ciudadano de su libertad.
4. Que la actuación concreta del judicial sea la condición sine qua non para privar de manera firme a una persona de libertad.
4. El valor superior que constituye la libertad exige que en su privación, como maxima garantía, entre en juego los tres poderes clasicos del Estado, ejecutivo, legislativo y judicial, según diferentes modulaciones. De este modo, únicamente es lícita la privación de libertad cuando se dan los siguientes supuestos

Junto a la idea del derecho a la libertad se maneja también el concepto de seguridad jurídica. La seguridad jurídica va a determinar los supuestos y los requisitos para privar de libertad a las personas. Esta comporta la ausencia de perturbaciones procedentes de medidas tales como la detención y otras similares que adoptadas arbitraria e ilegalmente, restringen o amenazan la libertad de toda persona de organizar en algún momento o lugar, dentro del territorio nacional, su vida individual y social con arreglo a sus propias convicciones.

En consecuencia este derecho, hay que entenderlo como la garantía jurídica del individuo frente al poder, dirigido a evitar no sólo la privación de su libertad, sino, también, cualquier forma arbitraria de represión. Cumple así dos objetivos: de unlado, le garantiza que no tiene nada que temer de ninguna autoridad mientras que el ejercicio de sus libertades, cualquiera que sea, se mantengan dentro de los límites de la legalidad; y de otro, que si es sospechoso de haberlos traspasado, exponiéndose así a una sanción, se le protege igualmente de toda represión arbitraria que exceda de los requisitos legales que regulen esa conducta. De ahí que el derecho a la seguridad de las personas sea la protección de vanguardia de todas las libertades y lo que permite su ejercicio regular.

2. el derecho a la integridad personal consagrado en el artículo 5.1 y 5.2 de la Convención Americana sobre Derechos Humanos.

Es aquel derecho humano fundamental y absoluto que tiene su origen en el respeto debido a la vida y sano desarrollo de ésta. Es el derecho al resguardo de la persona, en toda su extensión, bien sea en su aspecto físico como mental. El ser humano por el hecho de ser tal tiene derecho a mantener y conservar su integridad física, psíquica y moral.

El reconocimiento de este derecho implica, que nadie puede ser lesionado o agredido físicamente, ni ser víctima de daños mentales o morales que le impidan conservar su estabilidad psicológica.

Este derecho se encuentra consagrado en el derecho internacional desde el Estatuto del Tribunal Militar de Nuremberg de 1945, la Declaración Universal de Derechos Humanos de 1948 (artículo 5) 4. Col · loca la mostra sobre un portaobjectes amb unes pinces, i afegeix una gota deorceína B. Espera 1minut.
5. Posa el cobreobjectes sobre l'arrel i a sobre un segon portaobjectes. Ara pressionarem sobre la mostra per extendre les cèl · lules del meristema i així disposar-les en una sola capa. Si cal, dóna uns cops secs amb el mànec de l'agulla enmangada sobre el cobre, amb cura de no trencar-lo. Després col · loca unes tires de paper de filtre sobre la preparació, i prem amb el polze augmentant progressivament la pressió.
6. La preparació està ara a punt per l'observació al microscopi. Recorda que has de començar per l'objectiu de menys augments, i que pots canviar a altres objectius acord aconsegueixis enfocar i comprendre el que estàs veient, seleccionant les regions que vols veure amb més detall.
ACTIVITATS
Fotografia i identifica cèl·lules en diferents fases mitòtiques. Identifica alguna en fase de citocicinèsi. Pots vereu el fragmoplast?
No, desgraciadament no em pogut veure el fragmoplast.

CONCLUSIÓ
En aquesta practica hem pogut veure el tenyit de les cèl·lules gràcies al tint de l’orceina. Primer hem fet servir l’orceina A per fer que les cèl·lules s’estobesin i després em fet servir la orceina B per acabar les fotus.