UNIDAD XII
PRUEBA DE COOMBS (ANTIGLOBULINA HUMANA
Prueba de Antiglobulina Humana (Coombs) Directa e Indirecta. Significado clínico. Prueba de Coombs poliespecífica, monoespecífica, su correlato clínico.
Prueba antiglobulínica. Significado. Otras técnicas para detección de reacción antígeno -anticuerpo.

ANEMIA
Disminución de Hemoglobina por debajo de valores normales



Clasificación de Anemias
ARREGENERATIVAS
Lesión de células pluripotentes
Déficit de :
- Fe
- B12
- Fólico
REGENERATIVAS:
Hemorragia aguda
Anemias Hemolíticas

Anemias Hemolíticas
Destrucción del glóbulo rojo.

Disminución de la vida media ertrocitaria.
Aumento de la bilirrubina por el catabolismo aumentado de la Hemoglobina por la destrucción.

Anemias Hemolíticas
Congénitas
Hereditarias

Anemias Hemolíticas
Congénitas : Defecto del glóbulo rojo en su membrana, en la hemoglobina, en el metabolismo.

Anemias Hemolíticas
Adquiridas
1- Inmunes
2- No inmunes

Anemias Hemolíticas
Adquiridas
1- Inmunes: Destrucción por anticuerpos
* Autoinmunes: Formación de autoanticuerpos
* Alloinmunes: Aloanticuerpos


Aglutinación
Es la agregación mediada por anticuerpos, de las partículas que expresan antígenos en su superficie.
Los glóbulos rojos se aglutinan porque los anticuerpos se fijan a los determinantes antigénicos eritrocitarios

Hematíes aglutinados por una Ig G




Tamaño del anticuerpo
IgG sensibilizan gr sin formar mallas. Demasiado pequeña para unirse con mas de un gr (excepciones: A-B-M-N
Ig M sensibilizan gr y sí forman mallas. Por su tamaño y distribución de los lugares de reacción con los Ags puede unirse facilmente con varios grs y producir su aglutinación.

PRUEBA ANTIGLOBULINICA
1945: Coombs, Moura y Race
Detecta la fijación de Ac que no provocan aglutinación.
Emplea anticuerpos contra globulinas humanas.
Producen aglutinación visible de hematíes sensibilizados.

Principios
Todas las moléculas de Acs son Igs
Animales inyectados con Igs humanas producen Acs contra ellas: AGH
AGH de diversa especificidad según material usado en la inmunización
Células sin Igs adheridas no aglutinan
La AGH reacciona con los Acs humanos y las moléculas del complemento














¿Podemos darnos cuenta en el laboratorio que un paciente tiene Anticuerpos unidos a su membrana?






Lavar hematíes!!
Las globulinas libres pueden reaccionar con la AGH y dar pruebas falsas negativas por neutralización (Lavar los hematíes antes de añadir Suero de AGH)
PAD
Prueba de antiglobulina directa
Demuestra sensibilización eritrocitaria in vivo
PAI
Prueba de antiglobulina indirecta
Demuestra reacciones in vitro entre hematíes y Acs. (No aglutinan células en estudio)

PAD
Demuestra in vitro presencia de Acs oComplemento, en particular: Ig G y C3d, unidos a la superficie de los glóbulos rojos del paciente
Investigación de
AHAI
Hemólisis inducida por drogas
EHRN
Reacciones hemolíticas postransfusionales

PAI
Demuestra in vitro la presencia de Acs o Complemento fijado a los grs durante un tiempo de incubación.
Investigación de:
-Estudio (screening e identificación) de Acs en suero problema a través de gr de composición antigénica conocida (paneles)
-Determinación de Ag eritrocitarios a través de antisueros específicos
-Pruebas de compatibilidad pretransfusional

Reactivos antiglobulínicos
Poliespecíficos policlonales contra globulinas humanas
-IgG/C3d
Monoespecíficos policlonales contra globulinas humanas
-Ig G
-Ig A
-Ig M
-C3
-C4

Antiglobulina humana poliespecífica

Antiglobulina humana monoespecífica

Fuentes de error en las pruebas antiglobulínicas. Falsos negativos
Neutralización del reactivo AGH
Interrupción de la prueba
Almacenamiento incorrecto de los reactivos
Procedimientos incorrectos
Complemento
Solución Salina


Fuentes de error en las pruebas antiglobulínicas. Falsos positivos
Células aglutinadas antes del lavado
Partículas o contaminantes
Procedimientos incorrectos
Células con prueba antiglobulínica directa positiva
Complemento


Hematíes reactivos
Son suspensiones de hematíes conocidos, destinados al estudio de Acs.
Los reactivos globulares comerciales tienen periodos de vto. No > a 30 días.