Laboratorio de organica 1.
Practica: “Cromatografía en columna”



Objetivos: Determinar las diferencias entre una cromatografía en capa fina y una cromatografía en columna.
Conocer los fundamentos de una cromatografía en columna así como sus diferentes aplicaciones en la separación y purificación de mezclas.
Resultados
La cromatografía en columna, se hizo para separar una muestra de acido benzoico contaminada con azul de metileno siendo el adsorbente el dióxido de silicio y el eluyente Acetato de etilo.

En total se obtuvieron 8 fracciones cada una con 6 ml y se prosiguió a realizar una cromatografía en capa fina para así observar el comportamiento de la muestra con un eluyente de n-hexano-aceato de etilo y determinar que fracción contenía la sustancia pura (ac. Benzoico)

1 2 3 4 R 5 6 7 8 R
Para las fracciones 2, 3 y 4 dieron como resultado la aparición de 3 manchas situadas a la misma altura de las muestras de referencia aunque para la 3 y 4 se observaron ademas otras manchas inferiores.
Y por último se realizó la destilación de la fracción 2 aunque por motivos de errores practicos se perdió la muestra por un mal manejo del material y no fue posible obtener un rendimiento neto.
Analisis de Resultados
Los datos obtenidos en lacromatografía en columna fueron únicamente para colectar en fracciones (8 en total de 6 ml cada una) nuestra separación de la mezcla en varios componentes.
Aunque ya estaba predeterminada la selección del eluyente en la Cromatografía en columna que fue acetato de etilo, se tomó en cuenta su polaridad para que pudiera arrastrar nuestra mezcla y así ir obteniendo las distintas fracciones.
Al colocar nuestras placas de gel de sílice y disponer en ellas cada una de las fracciones, el comportamiento que se observó al utilizar el eluyente de una mezcla de n-Hexano y Acetato de etilo fue que de la fracción 2 a la 4 contenían acido benzoico, ya que se aplicó en las placas una muestra como referencia para indicarnos que efectivamente se encontraba la sustancia ahí (ac Benzoico), pero con la diferencia que para las placas 3 y 4 también existía una delgada pero notable mancha que supone que dichas fracciones estaban contaminadas, y descartandolas para realizar nuestra destilación de la fracción 2. Posiblemente si se hubiera hecho con mayor cuidado la preparación de la columna de la cromatografía anterior, se hubiera esperado al menos otra fracción que contuviera sólo la sustancia pura, ademas de que se contara con mayor tiempo.
Posteriormente se realizó la destilación para la fracción 2 para la separación de los componentes, paraasí esperar que se evaporara el eluyente y en la cola de la destilación quedara nuestro residuo que sería acido benzoico puro, aunque ocurrió el problema del mal manejo del equipo donde el matraz bola se volteó y se perdió toda la muestra en el recipiente mezclandose con agua. Se pudo de igual forma haber obtenido un rendimiento bajo debido a la rapidez con la que se realizó el procedimiento.
Conclusiones
La cromatografía en columna es una técnica que tiene múltiple aplicaciones, y es a menudo utilizada para separar gran cantidad de compuestos, ademas de que se puede realizar para la obtención de sustancias puras. Siendo muy practica en la industria e investigación como en el asilamiento de una sustancia que pueda provoque un efecto determinado.
Aunque en la técnica de cromatografía en columna existen varios métodos para hacer mas rapido el proceso es importante tomar en cuenta que un buen eluyente y dejar el tiempo necesario para la obtención de una fracción es la clave para tener una técnica adecuada, haciéndola mas específica y con mayor rendimiento en la obtención de una sustancia dada.
Cuestionario
a) Explique porqué el producto principal se eluyó y el colorante se adsorbió en la fase estacionaria? Por las diferencias de polaridad que existen entre las sustancia que se desea separar y el coloranteque contaminó la muestra.
b) Si se deseara recuperar el colorante adsorbido ¿Qué debería hacerse? Como la mayor parte del colorante se quedó en la fase estacionaria, sería recomendable separarlo para dejarlo secar y de ahí separarlo.
c) Un colorante desconocido, se piensa que puede ser azul de metileno, ¿Cómo se podría comprobar esta suposición utilizando un procedimiento basado en una técnica cromatografica? Utilizando un eluyente específico para esa sustancia ademas un adsorbente incapaz de retenerlo.
d) ¿Qué debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para una sustancia en una cromatografía en columna? Que su polaridad no sea tan alta porque la velocidad sería muy elevada y esa cromatografía no separaría completamente los diferentes componentes, ni tan baja porque simplemente no eluiría a la muestra.
e) La recuperación cuantitativa del producto principal de la practica, sería mas completa si se recogieran fracciones mayores ó menores de6 ml ¿Por qué? Para fracciones mayores de 6 ml, se esperaría obtener mas producto pero mas impuro y mas pureza y menor cantidad de compuesto principal para fracciones menores.
f) Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografía de adsorción en columna y capa fina. Separación de compuestos y obtención de sustancias puras.
Escriba una lista deeluyentes utilizados en cromatografía en columna en orden de polaridad decreciente. Etanol, etanol, acetona, acetato de etilo, n-hexano.
g) Diga cual es la diferencia entre la cromatografía en capa fina y la cromatografía en papel.
La especificidad de que la CCF es mucho mayor ya que el eluyente puede actuar mejor en esa superficie que en una de papel.
h) Indique la toxicidad de las sustancias que utilizó y cómo se podrían desechar
Acetato de etilo Nocivo por inhalación y por ingestión. Irrita los ojos, la piel y las vías respiratorias. El contacto prolongado con la piel puede desgrasarla y producir dermatitis. Evitar el contacto con la piel, ojos y ropa. No respirar vapores o niebla de pulverización. No lo trague
Dióxido de Silicio: Efectos de exposición prolongada para dióxido de silicio: Los pulmones pueden ser afectados por la exposición prolongada o repetida, dando lugar a neumoconiosis (silicosis). Esta sustancia es carcinógena para los seres humanos.
El azul de metileno es una sustancia nociva por ingestión. Puede causar irritación. Evitar respirar los valores con una ventilación adecuada y evitar también el contacto con ojos piel y ropa.

Bibliografía
SOTO, J. L.: Química Organica. Vol. I. Conceptos basicos. Ed. Síntesis, 1996.
GRAHAM SOLOMONS, T. W.: Química Organica. Ed. Limusa. México, 1999.