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La cromatografía



Introducción
La cromatografía es un método físico de separación de especies químicas estrechamente relacionadas en mezclas complejas que pueden ser un gas o un líquido. Se basa principalmente en una fase móvil y una fase estacionaria. En la fase móvil se disuelve la muestra, y esta se hace pasa por la fase estacionaria inmiscible. Existen diversos tipos de cromatografía como la de intercambio iónico, por afinidad, cromatografía liquida de alta eficacia (HPLC) y la cromatografía por exclusión molecular, siendo esta ultima la utilizada en el practico.
La cromatografía por exclusión molecular o también llamada filtración en gel, es una técnica utilizada para la separación de proteínas según su tamaño o peso molecular. La capacidad de separar estas moléculas se fundamenta en el uso de un gel cuya estructura matriz consta de esferas porosas microscópicas. Esta técnica se realiza principalmente en columnas rellenas de este gel que se fabrican especialmente para llevar a cabo la separación de las moléculas, correspondiente a la fase estacionaria. Los poros del gel poseen diferentes grados de fraccionamientos que dependeran de su tamaño. El gel que se utilizó en la experiencia fue el Sephadex G75, este es un polímero quesepara las moléculas con un tamaño entre 3000 y 70000 daltons. Las moléculas que no se encuentran dentro de este rango poseen una mayor dificultad de ingresar a los poros del gel o eluyen inmediatamente junto a la fase móvil (agua). Esta técnica de cromatografía posee una etapa de sembrado y elución de la muestra. Las muestras corresponden a una mezcla compleja de seroalbumina bovina (molecula aromatica) que posee un tamaño de 66463 Daltons, la fosfatasa acida de germen de trigo de 18000 daltons de tamaño y el citocromo C que es la molécula mas pequeña con 12400 daltons, y la segunda muestra el azul de dextrano, polímero de elevada masa molecular equivalente a 21030 daltons de caracter no iónico.


Para la identificación de las moléculas posteriormente separadas se mide su absorbancia. Para ello usualmente se utiliza una calibración correcta para obtener medidas de absorbancia a una determinada longitud de onda (280,415 y 550 [nm]), de esta manera se consigue un patrón que permite identificar la molécula desconocida a partir de la medición de la absorbancia. A una longitud de onda de 280 [nm] se identifican los compuestos aromaticos y a las longitudes de 415 y 550 [nm] se identifican los compuesto de naturaleaza………………………………


2. Consulte los siguientes conceptos y relaciónelos con el experimento
Soluciones: son mezclas homogéneas las cuales entran formadas por 2 o mas compuestos, los cuales no reaccionan entre si lo que quiere decir que cada uno tiene propiedades químicas diferentes y se encuentran en proporciones diferentes dependiendo de que mezcla sea. De acuerdo a las proporciones se le halla laconcentración.
Fracción: es una cantidad recogida de una muestra, en un proceso de separación. En el proceso una mezcla se separa en las fracciones que tienen composiciones que varíen según un gradiente.
Mezcla homogénea: una mezcla homogénea es aquella en que los componentes no se pueden identificar a simple vista, solo se nota una fase, pero el hecho que solo se note una fase no quiere decir que los compuestos estén reaccionando de hecho estos se pueden separar por métodos físicos dependiendo la mezcla que sea.
Cambio físico: es el que ocurre externamente, lo que quiere decir que no existe alteración de su estructura, ósea no hay reacción química, no se reordenan los atomos y no se forman sustancias nuevas.
Cambio químico: en este si hay una reordenación de los atomos, lo que quiere decir que hay formación de nuevas sustancias, los cambios ocurren externamente.
Liquido homogéneo: es aquel que todos sus componentes se encuentran completamente diluidos, es decir, no hay partículas solidas ni en ningún otro de los estados en q la materia se puede encontrar.

3. Porque no se evaporan de repente todos el líquido del matraz de destilación cuando se alcanza el punto de ebullición
Precisamente si se evapora todo el líquido no podría haber separación y de hecho en eso consiste la técnica separar líquidos los cuales sean homogéneospero que sus compuestos tengan diferentes puntos de ebullición por ende no bulle el líquido totalmente, lo que no bulle es simplemente porque tiene un punto de ebullición mucho mayor al líquido que se alcanza a destilar.

4. Porque no se debe llenar el balón de destilación mucho de la mitad de su capacidad
La principal razón es que si se llena el balón el líquido va a saturar el refrigerante lo que hace que pueda salir liquido sin ser destilado, otra de las razones es porque si se llena al empezar a bullir se forman burbujas, que se pueden evitar con piedritas de ebullición, estas también pueden salpicar y colarse en el destilado.

5. Cual es la desventaja de utilizar un matraz cuya capacidad es cuatro, cinco o mas veces el volumen del líquido que se va a destilar
La desventaja seria que se tendría problemas para recoger el destilado, en qué sentido, cuando se calienta la muestra a separar el primer líquido que se vaporice al ser un gas debe esparcirse por todo el recipiente para así empezar el proceso de destilación, si tenemos un muestras muy grande el gas se esparcira mucho mas, abra menos presión, lo que hace que sea poco el destilado que se recoja, ademas si se quiere obtener mas destilado, tendría que postergar el calentamiento y si hacemos esto corremos el riesgo de que otro liquido con un punto de ebullición unpoco mas alta que la del primer líquido y entonces tendríamos dos destilados en uno.

6. Un líquido organico comienza a descomponerse a 80°C. Su tensión de vapor es entonces de 36 mm ¿cómo se puede destilar el líquido?
En estos casos, se utiliza una destilación al vacío, ya que un líquido bulle cuando su presión de vapor se iguala con la P externa. Si uno baja la presión, hace que la presión de vapor se iguale con la externa a una temperatura menor que la de ebullición normal, que es a 1atm de presión. Entonces, se puede destilar con una temperatura menor a la cual descompone. En este caso por medio del vacío se hace que la presión baje por ende la temperatura de ebullición también disminuira.

7. Si el bulbo termométrico no se mantiene húmedo con condensado durante la destilación, la lectura del punto de ebullición sera mas alta o mas baja. Política de privacidad