I. INTRODUCCIÓN

Todos los seres vivos estan constituidos por una o mas células (unicelulares y pluricelulares, respectivamente). Los organismos unicelulares (libres o asociados) y las células de los organismos pluricelulares pueden presentar diversas formas características. Esta variedad de formas esta determinada, primordialmente, por la información genética, íntimamente relacionada con la función de dicha célula, así como también, por la presencia de una pared rígida y la disposición de una célula respecto de otra.

Las diferentes formas celulares, en las células eucariontes, se pueden clasificar según su semejanza a cuerpos geométricos, así encontramos células

Esféricas, como algunos unicelulares y la mayoría de los gametos femeninos.
Cúbicas, como las células de los túbulos renales y de la glandula tiroides.
Planas, tales como las células epidérmicas de los vegetales, del peritoneo y del endotelio de los vasos sanguíneos.
Prismaticas, como las células epiteliales que revisten las vellosidades intestinales.
Poliédricas, como los hepatocitos y adipocitos.

Ademas, se pueden clasificar de acuerdo a su semejanza a estructuras conocidas

Estrelladas, como el soma de las neuronas motoras del asta anterior de la médula espinal.
Fusiformes (huso), como por ejemplo las células del tejido muscular liso.

Así, también, existen algunas células quecambian constantemente de forma como las amebas y los leucocitos.

En el caso de las células procariontes, como las bacterias, basicamente se reconocen tres formas bacterianas, que son: cocos, bacilos y espirilos.


ESTRUCTURA CELULAR

En toda célula se distingue el citosol, que es la porción líquida del citoplasma y la fracción microsomal, que es la porción sólida constituida por el núcleo, los organelos y el sistema de membranas.




II. MICROSCOPIO COMPUESTO: MANEJO Y FUNCIONAMIENTO

DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se utiliza para el estudio detallado de objetos, que por su tamaño, son invisibles o confusos al ojo humano, formando imagenes de mayor tamaño, reales e invertidas.

El microscopio compuesto consta de las siguientes partes

1. Sistema mecanico
Pie: es la base de sustentación y estabilidad, y su forma varía según el modelo de microscopio.
Columna: es la región articulada del pie que sostiene el espejo, condensador, platina y tubo con el sistema óptico de ampliación.
Platina: es una plataforma horizontal con un orificio central por donde pasan los rayos luminosos y es aquí donde se ubica la preparación con un carro móvil para desplazarla.
Tubo o cañón: lleva en su extremo la lente ocular y en el inferior el revolver.
Revolver o tambor: es una pieza giratoria situada en el extremo inferior del tubo y por rotación moviliza las diferentes lentes objetivos que posee el microscopio.
Tornillos de focalización: el enfoque del microscopio se logra variando la distancia entre la lente objetivo y la platina. Para ello existen dos tornillosa cada lado del microscopio, el primero, llamado macrométrico, se usa para el enfoque aproximado y el segundo esta destinado al enfoque de precisión, denominado micrométrico.

Este último trae una escala graduada; cada marca indica un avance de dos micrones.

2. Sistema de iluminación
Fuente luminosa: puede ser natural o artificial (luz blanca, ultravioleta o monocromatica).
Condensador: es un dispositivo formado por un sistema de lentes que concentra la luz, proveniente de la fuente luminosa, en la preparación. Este dispositivo puede moverse por medio de un tornillo de control acercandose o alejandose de la preparación.
Diafragma: esta ubicado en el condensador y sirve, ademas, de regular la cantidad de luz, para eliminar la aberración esférica y cromatica de las lentes. Su apertura puede variar con la ayuda de una palanca horizontal.
Anillo porta-filtro: anillo de metal, anexo del condensador en el cual puede colocarse un filtro de color; con esto se hara resaltar una determinada estructura en estudio.

3. Sistema de ampliación
Lentes oculares: son sistemas ópticos ubicados en la parte superior del tubo, próximos al ojo del observador. Los oculares estan formados, generalmente, por un
sistema de dos lentes plano-convexas, simples o compuestas, separadas por un diafragma interno. El lente inferior es el llamado lente de campo, su propósito no es aumentar la imagen sino recoger la mayor cantidad de rayos divergentes que vienen del objetivo; este tiene un foco en el diafragma y ahí la imagen es aumentada con la lente superior. Los oculares mas usados tienen un aumento de: 6X, 8X, 16X y 20X.
Lentes objetivos: sonun sistema de lentes (3 o 4) acomodadas en el revolver. Esta pieza permite un cambio rapido de objetivo durante la observación. Estan marcadas con su aumento y la apertura numérica, por ejemplo 10:1 AN 0 , esto quiere decir que el objetivo tiene un aumento de 10 diametros siendo su apertura numérica 0,25.

Dentro de las técnicas de observación que se utilizan en el trabajo con el microscopio se encuentran

- Objetivo a seco: en la que entre la preparación y la lente media aire.

- Objetivo de inmersión: en la cual entre la preparación y la lente es necesario colocar una sustancia cuyo índice de refracción sea lo mas aproximado al del vidrio (1.52). Para esto se utiliza el aceite de inmersión.


ACTIVIDAD

En el siguiente esquema identifique las partes descritas anteriormente para un microscopio óptico




TÉCNICAS DE MANEJO DEL MICROSCOPIO
La manipulación del microscopio requiere tener presente las siguientes instrucciones basicas
Limpieza
1. Limpiar con el paño de microscopía las partes ópticas y mecanicas del microscopio. Si se requiere utilice unas gotas de xilol.

Iluminación
1. Encienda la lampara.
2. Baje el condensador.
3. Coloque la lente aumento lupa (4X) en posición de enfoque. Desplace la platina o la lente dependiendo de su microscopio hasta la posición de tope.

Técnica de observación
1. Aleje la lente objetivo de la platina.
2. Cerciórese que la preparación esté limpia y con el cubreobjetos hacia arriba.

3. Con la mano izquierda abra la pinza del carro.
4. Con la mano derecha coloque la preparación sobre la platina ajustandola en el carro con la pinza.
5. Desplace el carro demodo que el objeto a observar quede justo en el centro del orificio de la platina.

Enfoque de la preparación
1. Con ayuda del tornillo macrométrico acerque el objeto a observar al lente objetivo cuidando que la lente objetivo no roce la preparación.
2. Observando por el ocular, ya que el enfoque es aproximado, afine la observación usando el tornillo micrométrico.
3. Recuerde que el tornillo micrométrico encontró la distancia de enfoque por lo tanto los movimientos del micrométrico deben ser muy lentos y nunca mas de un cuarto de vuelta.
4. Gire el revolver para cambiar a aumento mayor (40X o 45X). Como las lentes son parafocales, para observar con nitidez, basta enfocar solamente con el micrométrico.
Si tiene problemas de observación afine el enfoque, revise el sistema de iluminación y cerciórese de que su preparación esté colocada correctamente sobre la platina con el cubreobjetos hacia arriba.

Revisión
Si realizadas estas etapas, no logra observar con absoluta claridad y nitidez, fije nuevamente su atención en

1. si el sistema óptico, en general, esta limpio. Esto se averigua girando el ocular; si esta sucio, giraran las partículas en él depositadas.

2. si la preparación esta efectivamente con el cubreobjeto hacia arriba.

3. si el objetivo esta en posición correcta, es decir, en posición de enfoque
4. si el diafragma esta convenientemente abierto.

5. si el condensador esta en posición apropiada.

6. si los problemas persisten consulte a su profesor.


Enfoque con objetivo de inmersión
1. Una vez enfocada la preparación con el objetivo 40X, gire el revólver de modo que la lente de inmersión quedeen posición intermedia entre las lentes 40X y 100X.

2. Coloque sobre el cubre objeto una gota de aceite de inmersión que le sera proporcionado por su profesor.

3. Lleve el objetivo de inmersión al eje óptico.

4. Sólo con ayuda del tornillo micrométrico, girando levemente tendra el objeto en foco. Si la observación no es nítida, desplace el condensador hasta encontrar el punto de maxima iluminación.

5. Una vez terminada su observación, limpie tanto la preparación como la lente, para esto utilice un paño ligeramente humedecido con xilol. Debe tener mucho cuidado ya que si utiliza exceso de solvente correra el riesgo de inutilizar este objetivo, ya que la lente esta montada en él gracias a una sustancia soluble al solvente antes indicado.


Técnicas de observación

Al finalizar su observación debe dejar todo en las mismas condiciones en las que encontró el microscopio. Para esto tenga las siguientes precauciones.
1. El microscopio y sistema de lentes deben quedar impecablemente limpios.

2. Gire el revolver de modo de dejar en posición de observación la lente de menor aumento.

3. El condensador debe quedar al maximo abajo.

4. El cordón del sistema de iluminación debe enrollarse al pie del microscopio.

5. El microscopio debe quedar en posición vertical (no inclinado) y en posición estable (nunca al borde de la mesa de trabajo o del estante).





III. OBJETIVOS

Identificar las diferentes formas celulares en organismos unicelulares y pluricelulares.

Diferenciar morfológicamente células procariontes y células eucariontes.

Distinguir morfológicamente células animales de células vegetales.IV. ACTIVIDADES

1. Observación de Células Eucariontes

1.1. Células Vegetales

1.1.1. Observación de células vegetales en Elodea sp.

Procedimiento

Tome una hoja joven del extremo del apice de la rama de Elodea sp.

Sobre un portaobjetos limpio coloque una gota de agua y en ella deposite la hoja de Elodea sp. y cúbrala con un cubreobjetos.

Coloque su preparación en el microscopio, enfoque con el aumento menor (10X) y posteriormente realice su observación en el aumento mayor (40X). Dibuje y registre sus observaciones, en las cuales debe registrar disposición de las estructuras observadas, movimiento, colores, etc.















NOTA: Todos los esquemas deben estar debidamente coloreados y rotulados.

1.2. Células Animales

1.2.1. Observación de células de mucosa bucal

Procedimiento

Coloque una gota de suero fisiológico (NaCl 0,9%) sobre un portaobjetos limpio.
Con un palito de helado, frote ligeramente la cara interna de la mejilla. Mezcle el material obtenido con un movimiento de rotación con la gota de suero fisiológico hasta obtener un fluido homogéneo.
Agregue una gota de verde jano 0 % y déjelo actuar por 5 minutos.
Cubra la preparación y observe con aumento mayor. Dibuje y registre sus observaciones.













1.2.2. Observación de células sanguíneas

Procedimiento
Coloque la preparación en el microscopio, enfoque con aumento menor y pase a aumento mayor.
Identifique los glóbulos rojos y blancos, y establezca diferencias entre ellos.
Dibuje cada una de las células observadas y registre sus observaciones.














1.2.3.Observación de células musculares estriadas

Procedimiento:
Coloque la preparación en el microscopio, enfoque con 10X y observe los haces de fibras musculares en las distintas disposiciones
Pase luego a aumento mayor y distinga los núcleos dispuestos en la periferia de la fibra y las estriaciones de las células. Dibuje y anote sus observaciones.















1.2.4. Observación de células nerviosas

Procedimiento
Coloque la preparación en el microscopio y en aumento 4X ubique la médula espinal. En ella distinga las astas de sustancia gris e identifique las astas anteriores y posteriores.
Con aumento menor concentre su atención en una de las astas anteriores, pase a aumento mayor e identifique los somas neuronales. Dibuje y registre sus observaciones.

















2. Observación de Células Procariontes


2.1. Observación de bacilos

Procedimiento

Coloque su preparación de Escherichia coli sobre la platina del microscopio.
Enfoque con aumento menor (10X) y luego pase a aumento mayor (40X), ubique una zona de poca densidad celular.
Sin desenfocar agregue una gota de aceite de inmersión sobre la preparación y cambie al lente de inmersión (100X), con el tornillo micrométrico ajuste el enfoque.
Fije su atención en una célula aislada y dibújela en el campo visual designado y registre sus observaciones, indicando color y disposición de las células.














1
2
Observación de estreptococos

Procedimiento

- Repita el procedimiento descrito para la observación de bacilos, indicando color y disposición de las células.