Parte Experimental
Para determinar la actividad enzimatica de la β –galactosidasa es necesario confeccionar una curva de calibración con una concentración conocida de sustrato patrón o-nitrofenol. Para confeccionar la tabla se dispuso de los siguientes compuestos:
* o-nitrofenol (ONF) 0,5[mM]
* Amortiguador fosfato de Sodio pH 7,2 0,1M
* Carbonato de Sodio 1,0M
* Agua destilada
A continuación se muestra el protocolo para la curva de calibración, el cual va desde 0,02 a 0,3[µmoles/mL] de ONF. Luego a cada tubo se le midió su absorbancia, resultados que se detallan mas adelante.
Tabla I: Protocolo para la confección de la Curva de calibración
Tubo | ONF [mL] | ONF [µmoles] | Amortiguador [mL] | Agua [mL] | Carbonato de Sodio [mL] | Volumen Total [mL] |

1 | 0 | 0 | 0,5 | 2,2 | 0,3 | 3,0 |
2 | 0,3 | 0,05 | 0,5 | 1,9 | 0,3 | 3,0 |
3 | 0,6 | 0,1 | 0,5 | 1,6 | 0,3 | 3,0 |
4 | 1,2 | 0,2 | 0,5 | 1,0 | 0,3 | 3,0 |
5 | 1,5 | 0,25 | 0,5 | 0,7 | 0,3 | 3,0 |
6 | 1,8 | 0,3 | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 3,0 |

Luego se definió 1,5[mL] como volumen de incubación y ademas se realizaron doscontroles, blanco enzima y blanco sustrato para medir la actividad enzimatica.
Se determinó el inicio de la incubación al instante que se agregó la enzima a los tubos de la reacción y del blanco sustrato. Para el tubo correspondiente al blanco enzima el inicio de incubación se consideró al momento de agregar el sustrato. Cabe destacar que para este procedimiento se utilizó un sustrato artificial (o-nitrofenil- β –galactósido, ONFG [0,01M]) dado que al entrar en contacto con la enzima se torna de un color amarillo, lo que hace mas evidente y mas facil de detectar la actividad de la enzima.
Los tres tubos fueron incubados por 9 minutos a una temperatura ambiente de 30°C, y luego se midió la absorbancia de cada uno de ellos. En la tabla a continuación se detalla la preparación del tubo de incubación y los dos controles.
Tabla II: Volumen de Incubación
Tubo | Agua [mL] | Amortiguador[mL] | Enzima [mL]β –galactosidasa | ONFG [mL] | Volumen Total [mL] | ΔT [min] |
Los organismos capaces de realizar la metanogénensis se llaman metanógenos. Los microbios que realizan la metanogénesis no tienen núcleo ni organulos separados por membranas (es decir, son procariotas). Los metanógenos son un grupo muy antiguo de organismos, miembros delas arqueobacterias (o arqueas).
Los metanógenos son anaerobios estrictos (mueren en presencia de oxígeno), por lo que sólo se encuentran en entornos en los que el oxígeno es reducido. Sobre todo son entornos que experimentan una descomposición de materia organica, como terrenos pantanosos, el tracto digestivo de los animales y sedimentos acuaticos. La metanogénesis también se da en zonas donde no hay presencia de oxígeno ni descomposición de materia organica, como el subsuelo profundo terrestre, las fuentes hidrotermales de las profundidades marinas y las reservas de petróleo.

Producción de metano a partir de moléculas organicas
Las bacterias metanógenas pueden producir también metano a partir de sustratos organicos sencillos como el acido acético, el formiato, el metanol, la metilamina, el sulfuro de dimetilo y el metanotiol. Mediante 14C se ha demostrado que el metano se origina exclusivamente a partir del carbono metílico del acido acético
CH3COOH → CH4 + CO2
Por tanto, estas bacterias pueden producir metano a partir de formas parcialmente reducidas de carbono contenido en compuestos organicos: tales reacciones pueden considerarse como verdaderas fermentaciones.
La bioquímica de la metanogénesis es relativamente compleja eimplica a las siguientes coenzimas y cofactores: F430, coenzima B, coenzima M, metanofurano y metanopterina.
Halófilos extremos
Halófilo es el adjetivo que se aplica a los organismos que viven en medios con presencia de gran cantidad de sales. La palabra esta formada con los términos griegos halos, sal, y filo, amante de, por lo que literalmente significa amante de la sal.
Los organismos halófilos son extremófilos ya que viven en condiciones extremas, en este caso, en entornos con mucha sal como zonas litorales, salinas y lagunas salobres.
En organismos normales, la sal hace que mueran por deshidratación debido a la ósmosis. Si el entorno es salino, con mucha concentración de sales, el agua del interior de las células tiende a salir hacia su exterior. Es decir, se desecan y mueren.
Sin embargo, en los halófilos esto no ocurre. Viven donde otros organismos morirían. Ello es posible gracias a diversas adaptaciones fisiológicas que les permiten retener agua. Uno de los mecanismos que han desarrollado es albergar en el interior de sus tejidos concentraciones de un soluto compatible a las sales (acido polihidroxibutírico o PHB) mayores que en el exterior. Así el agua penetra por ósmosis.
Algunos de estos halófilos pertenecen al dominio Archaea.