Determinación de Fósforo

Fundamento: El fósforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente acido para la formación de un complejo .La absorbancia de este complejo leído en UV cercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo.

Tipo de método: UV (340 nm
fosfo-molibdato

Muestras(s): Suero

Condiciones: No se debe usar plasma, evitar contaminación
Almacenamiento: de 2 a 25ºC

Estabilidad: Estables hasta fecha de caducidad aun después de abrir

Condiciones del paciente: Dejar de tomar medicamentos que pueden afectar los resultados del examen.

Características del método: La prueba es lineal hasta concentraciones de fosforo 20 mg/dl. Utiliza agentes reductores (hidroquinona,ANS (acido 1-amino-2naftol-4-sulfonico) ANS+100ºC x5 min, SnCl2, SnCl2+hidrazina,NH4FeSO4, p-semidina)

Linealidad: 20 mg/dL (la concentración puede llegar solo a este valor para seguir la linealidad)

Sensibilidad: (es el valor mínimo que detecta el equipo para poder medir) 0,02 mg/dL

Interferencia: Bilirrubina (interferencia baja hasta 28 mg/dL)
Hemoglobina (bajo efecto hasta 100 mg/dl)
Triglicéridos ( bajo efecto hasta 1250 mg/dl)
Acidos absorbicos (No muestra ningún efecto hasta los 20 mg/dl)


Valores referencia: 4,49-6,47 mg/dl
media: 5,48 mg/dl


METODO ALTERNATIVO

Test in Vitro para la determinación cuantitativa del fósforo.
El fósforo y el calcio se encuentran en la sangre en una relación de 6 a 10.
El aumento de la concentración de fósforo provoca una disminución del nivel de calcio, mecanismo que se ve influido por una interacción entre la parathormona y la vitamina D. A

Fundamento
En presencia de acido sulfúrico, el fosfato inorganico forma un complejo de fosfomolibdato de amonio con el molibdato deamonio que se expresa con la fórmula (NH4)3[PO4(MoO3)12].

H2SO4
Fosfato + molibdato amonico fosfomolibdato de amonio

La concentración del fosfomolibdato formado es directamente proporcional a la concentración de fosfato inorganico y se mide fotométricamente.


Tipo de metodo: Molibdato UV.

Muestras: suero,plasma orina.
Fermentaciones específicas
Las fermentaciones específicas son manipuladas por el hombre con el objeto de obtener el etanol en ciertas bebidas. Para ello se emplean principalmente los azúcares de las frutas, los cereales y de la leche. La producción de estas bebidas es en la mayoría de los casos local debido a la disponibilidad de los substratos, por ejemplo en los países mediterráneos la uva es frecuente y por lo tanto la fermentación del vino también, el mismo patrón puede hacerse con otros materiales como el arroz en Asia o el maíz en Latinoamérica. De esta forma la tradición de los procesos de fermentado se han asociado a las diversas etnias o grupos sociales.
Fermentación del vino

En la imagen se muestra unas uvas del tipo Cabernet Sauvignon empezando a interaccionar con los hollejos (piel de la uva) durante el proceso de fermentación.
La fermentación del vino es de las más conocidas y estudiadas por afectar a una industria muy extendida y con gran solera (véase: Historia del vino). En el caso del vino las levaduras responsables de la vinificación son unos hongos microscópicos que se encuentran de forma natural en los hollejos de las uvas (generalmente en una capa en forma de polvo blanco fino que recubre la piel de las uvas (vitis vinifera l.) y que se denomina 'pruina'). Los vinos deben tener una cantidad de alcohol debido a la fermentación de al menos un 9% en volumen. Con la excepción de los vinos verdes como puede serel chacolí que pueden tener una graduación inferior.34La fermentación alcohólica del vino es muy antigua y ya en la Biblia se hacen numerosas referencias al proceso. Las especies de levaduras empleadas en la elaboración del vino suelen ser por regla general las Saccharomyces cerevisiae aunque a veces también se emplean la S. bayanus y la S. oviformis, aunque en muchas variedades de vides la kloeckera apiculata y la metschnikowia pulcherrima son levaduras endógenas capaces de participar en las primeras fases de la fermentación.  Para frenar la aparición de bacterias indeseables y otros organismos limitantes de la fermentación se suele esterilizar el mosto a veces con dióxido de azufre (SO2) antes del proceso.
La elaboración del vino pasa por una fermentación alcohólica de la fruta de la vid en unos recipientes (hoy en día elaborados en acero inoxidable) en lo que se denomina fermentación tumultuosa debido a gran ebullición que produce durante un periodo de 10 días aproximadamente (llegando hasta aproximadamente unas dos semanas). Tras esta fermentación 'principal' en la industria del vino se suele hacer referencia a una fermentación secundaria que se produce en otros contenedores empleados en el trasiego del vino joven (tal y como puede ser en las botellas de vino). Los vinos blancos fermentan a temperaturas relativamente bajas de 10s-15 °C y los vinos tintos a temperaturas mayores de 20s-30 °C. A veces se interrumpe voluntariamente la fermentación etílica en el vino por diversas causas, una de las más habituales es que haya alcanzado la densidad alcohólica establecida por la ley. En otros casos por elcontrario se activa de forma voluntaria el proceso de fermentado mediante la adición de materiales azucarados, este fenómeno recibe el nombre de chaptalización y está muy regulado en los países productores de vino.36
Fermentación de la cerveza

Cocción del mosto antigua en Holsten-Brauerei Hamburgo.
La cerveza es una bebida alcohólica producida por la fermentación alcohólica mezcla de algunos cereales (en forma de malta) mezclados con agua. Los cereales empleados son por regla general: cebada, centeno, trigo, etc. El contenido de la cerveza ya se reglamentó en Europa en la famosa ley alemana de la Reinheitsgebotque data
Condiciones: Suero. Debe ser separado rapidamente antes que las celulas liberen su fosfato(ya que es principal anion intracelular)

Plasma tratado con heparina de litio y EDTA bipotasico

Recoger la orina en recipientes sin detergente. Una vez recogida la orina, acidificar con acido clorídrico para ser estables por mas tiempo(ya que posee gran cantidad de fosfato organico que se descomponen a temperatura elevada.

Condiciones del paciente: Paciente en ayunas antes de la extracción de la muestra. El fosfato es mas bajo durante el periodo menstrual.

Almacenamiento: sin abrir de 2-8ºC. En uso hasta 12 semanas

Valores referencia
Suero/plasma: Adultos 2,7-4,5 mg/dL

Orina: 1ra orina de la mañana 40-136 mg/dL

Orina de 24 horas: 0,4-1,3 g/d

Método de referencia

Tipo de método: Sin reducción a 340 nm. Bicromatico(340 y 389 nm)
Equipos automatizados y semiautomatizados

Alrededor de la mitad de la sensibilidad a 340 nm presenta problemas de blanco por hemolisis y lipemia. Es mas rapida y sencilla y aumenta la estabilidad de los reactivos. también permite obtener una variación de absorbancia tres o cuatro veces mayor que las reducciones del azul de molibdeno.

Precisión: 25 mg/L CV 9,2%
Linealidad: 80 mg/L


Conclusión: Todo analizador con una buena fotométrica a 340 nm es suficiente para un analisis exacto y sensible de fosfato mediante la determinación directa del complejo fosforo-molibdato.Resultados intra ensayo:


|Concentración patológico |Desviación estandar |Coeficiente de variación |
|(mg/dL) |patológico |patológico (%) |
|7,623 |1,192 |17,6 |
|7,299 | | |
|5,414 | | |










|Concentración normal (mg/dL)|Desviación estandar normal |Coeficiente de variación |
| | |normal (%) |
|6,902 |1,968 |35 |
|6,605 | | |
|3,353 | | |


Resultados inter ensayo

|Concentración normal |Desviación estandar normal|Coeficiente de variación normal|
|(mg/dL) | |(%) |
|6,422 |0,884 |15,68 |
|4,679 | | |
|5,822 | | |


|Concentración patológico |Desviación estandar |Coeficiente de variación |
|(mg/dL) |patológico |patológico (%) |
|7,593 |0,649 |8,317 |
|7,270 | | |
|8,548 | | |