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CATALASA - Practicas de bioquimica metabolica



CATALASA

RESULTADOS Y OBSERVACIONES

A).- CATALASA

TUBO ·1: 2ml de H2O2 al 3% + 3ml de sangre diluida
Se llevo esta mezcla aun baño María de 37 sC durante 5 min. Aquí se leva acabo la reacción total de la catalasa descomponiendo el H2O2 en agua y oxigeno

2 H2O2 + CATALASA O2 + 2 H2O

TUBO · 2: 2ml. de H2O2 AL 3% + 3ml de sangre diluida (calor)
Se llevo esta mezcla aun baño María de 37 sC durante 5 min. El calor aquí coagula las proteínas de la sangre dándole un efecto inibidor a la reaccion.


TUBO ·3: 2ml de H2O2 al 3 % + 5 gotas de cianuro de sodio + sangre
Se llevo esta mezcla aun baño María de 37 sC durante 5 min. Al combinarse aquí el cianuro con el Fe de la catalasa provoco un efecto inhibidor.


TUBO · 4: 2ml de H2O2 al 3% + PLNO3 al 5% + 3 ml de sangre
Se llevo esta mezcla aun baño maria de 37 sC durante 5 min. El PLNO3 por ser metal pesado, precipita las proteínas dando un efecto inhibidor.


B).- DESHIDROGENACION LACTICA

TUBO ·1 : 5ml de Azul de Metileno al 0.02% + 10 gotas de lactato desodio al 5% + suspensión de levadura al 2% + aceite mineral


A los 3 min.: color azul fuerte
Alos 6 min.: Color azul muy clarito
A los 9 min.: color blanco
A los 12 min.: color blanco
A los 15 min.: color blanco

TUBO 2: 5 ml. de Azul de Metileno al 0.02 % + 10 gotas de lactato de sodio al 5 % + suspensión de levadura al 2% (sometido a calor antes) + aceite mineral
A los 3 min.: color azul fuerte
Alos 6 min. Color azul claro
A los 9 min.: color blanco
A los 12 min.: color blanco
A los 15 min.: color blanco

TUBO ·3: 5ml de Azul de Metileno al .02% + suspensión de levadura al 2 % + aceite mineral.
A los 3 min.: color azul fuerte
Alos 6 min. Color azul
A los 9 min.: color azul
A los 12 min.: color azul muy clarito
A los 15 min.: color blanco


LA RXN TOTAL ES:

Piruvato + lactato deshidrogenasa Lactato

Utilizando como fuente de deshidrogenasa láctica la levadura y como aceptor de hidrógenos al azul de metileno.


CONCLUSIONES

En cuanto al experimento de la catalasa vamos la reaccion normal y la reaccion con los efectos inhibidores del NaCN y del PLNO3 en la reaccion de la catalasa, utilizando como fuente de catalasa la sangre diluida en la reaccion. Sabiendo que la catalasa de la sangre es una de las mas activas y por l tanto al llevar acabo esta practica vimos la actividad o reaccion total de esta enzima.
Encuanto al experimento realizado de la deshidrogenasa láctica vimos la reaccion normal y la reacción llevadaacabo con la levadura como fuente de deshidrogenasa láctica y el azul de metileno como aceptor de hidrógenos del NADH + H. Aquí al utilizar el aceite mineral se evita el contacto de la reaccion con el oxigeno atmosférico que haría reversible la reaccion; por lo tanto al llevar acabo esta practica obtuvimos un resultado positivo tanto en la practica como teóricamente.


CUESTIONARIO

1 sCuál es el efecto del cianuro en la reaccion de la catalasa y como se explica el fenómeno?
Al combinarse el cianuro con el Fe de la catalasa provoca un efecto inhibidor.

sQue inhibidor es mejor el cianuro o el nitrato de plomo?
El cianuro es mejor inhibidor, pero eso no impide que el nitrato de plomo al igual que el calor, la ácida sodica y la hidroxilamina, sean inhibidores, pero estos últimos se unen o forman un complejo con el átomo de Fe de la catalasa provocándole también un efecto inhibidor.

sEscriba la reaccion de la catalasa y diga a que se deben las burbujas cuando se añade sangre al vaso de la reaccion?
2H2O2 + CATALASA O2 + 2H2O
Las burbujas se provocan por el desprendimiento de oxigeno en la reaccion

4.- sCuál es la fuente de la catalasa en la reaccion hecha en el laboratorio?
La sangre diluida

5 sCual es la función normal de la catalasa en el organismo humano?
Catalizar la descomposición del agua oxigenada que se forma durante algunos procesos de oxido reducción cellr.

sPor qué la reaccion de la deshidrogenasa láctica sehace mas rápida cuando en puesto experimento añadimos lactato de odio?
Acelera la reaccion de la deshidrogenasa láctica, si no se adicionara también se llevaría cabo la reaccion pero más lenta, ya que la levadura lleva pequeñas cantidades de lactato, por lo tanto con una mayor concentración de lactato se acelera la reaccion.

sQué función tiene el azul de metileno en la reaccion de la deshidrogenasa láctica? Explique sQué otro compuesto podría usarse en vez de azul de metileno?
El azul de metileno se usa como aceptor de hidrógenos, también se podría utilizar cualquier otro tipo de compuesto siempre y cuando este se utilice como aceptor de hidrógenos.

spor que no usamos NAD en lugar de azul de metileno en la reacciona en la deshidrogenasa láctica? En que forma se podría medir la reaccion usando NAD que es el cofactor normal invivo?
Por que el NAD no se usa en un sistema invitro, es mas fácil utilizarlo en un sistema invivo o sea a nivel industrial.



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