TÉCNICAS DE ESTUDIO DE LAS CÉLULAS.
Cuando hablamos de técnicas de estudio de las células estamos
hablando de la citología y la forma en que estudiamos esto.
Citología: Parte de la biología que estudia la célula y sus funciones.
Dentro de estas técnicas existen 3 que son las más importantes y que tienen
mayor importancia en este estudio de las células,
haciéndose indispensables para cualquier tipo de estudio hoy en día. Estas 3
técnicas de estudio son las siguientes
1. Microscopia:
- Microscopia óptica.
- Microscopia electrónica.
2. Fraccionamiento Celular o División Celular.
3. Citoquímica.
5.1 MICROSCOPIA
Consiste en el uso básicamente de microscopios, estos son de 2 tipos, los
ópticos (microscopia óptica) y los electrónicos (microscopia electrónica). La
microscopia como tal consiste en el aumento del objeto a observar, dado que el
ojo humano tiene un poder de resolución de 0,1 mm (100 m), y las células tienen
tamaños inferiores.
Definiciones de conceptos y características de sus formas de uso:
Microscopio:
Un microscopio es cualquiera de los distintos tipos de instrumentos que se
utilizan para obtener una imagen aumentada de objetos minúsculos o detalles muy
pequeños de los mismos, estos son usados para cualquier tipo de cosas que
deseemos vermas detalladamente, que nuestros ojos no sean capaz de observar con
detencion o que simplemente no podamos ver. Existen 2 tipos de microscopios
condiferentes funciones, ademas de tener diferente formas de empleo:
1. Microscopio Optico (microscopia optica):
Utiliza luz visible y lentes ópticas para aumentar la imagen. Su poder de
resolución puede llegar a 0 m , con lo que un objeto
puede ser ampliado un máximo de 1500 veces. Permite la
observación de células vivas.
Este es el microscopio mas usado, que se sirve de la luz
visible para crear una imagen aumentada del
objeto. El microscopio óptico más simple es la lente convexa doble con una
distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un
objeto hasta 15 veces. Por lo general se utilizan microscopios compuestos, que
disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos
microscopios ópticos pueden aumentar un objeto por
encima de las 2.000 veces.
El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el
ocular, montados en extremos opuestos de un tubo
cerrado. El objetivo está compuesto de varias lentes que crean una imagen real
aumentada del
objeto que es examinado. Las lentes de los microscopios están puestas de forma
que el objeto que se desee examinar se encuentre en el punto focal del
ocular. Cuando se mira a través del ocular se ve una imagen
virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio
depende de las longitudes focales de los dos sistemas de lentes.
El equipamiento adicional de un microscopio optico
consta de un armazón con un soporte que sostieneel material examinado y de un
mecanismo que permite acercar y alejar el tubo para enfocar la muestra.
Los especímenes o muestras que se examinan con un
microscopio son transparentes y se observan con una luz que los atraviesa, y se
suelen colocar sobre un rectángulo fino de vidrio. El soporte tiene un orificio por el que pasa la luz. Bajo el soporte se
encuentra un espejo que refleja la luz para que
atraviese el espécimen. El microscopio puede contar con una fuente de luz eléctrica que dirige la luz a través de la muestra.
La fotomicrografía, que consiste en fotografiar objetos a través de un microscopio, utiliza una cámara montada por encima del ocular del
microscopio. La cámara suele carecer de objetivo, ya que el microscopio actúa como
tal.
Microscopios ópticos especiales
Hay diversos microscopios ópticos para funciones especiales.
Uno de ellos es el microscopio estereoscópico, que no es sino un par de microscopios de baja potencia colocados de forma
que convergen en el espécimen. Estos instrumentos producen
una imagen tridimensional.
El microscopio de luz ultravioleta utiliza el rango
ultravioleta del espectro luminoso en lugar del rango visible, bien
para aumentar la resolución con una longitud de onda menor o para mejorar el
detalle absorbiendo selectivamente distintas longitudes de onda de la banda
ultravioleta. Dado que el vidrio no transmite las longitudes de onda más cortas
de la luz ultravioleta. Además, dado que la radiación
ultravioleta es invisible, la imagen se muestra con fosforescencia en
fotografía o con un escáner electrónico. El microscopio de luzultravioleta se utiliza en la investigación
científica.
El microscopio petrográfico se utiliza para identificar y
estimar cuantitativamente los componentes minerales de las rocas ígneas y las
rocas metamórficas. Cuenta con un prisma de
Nicol u otro tipo de dispositivo para polarizar la luz que pasa a través del espécimen examinado.
Otro prisma Nicol o analizador determina la polarización de la luz que ha pasado a través del espécimen. El microscopio tiene un soporte giratorio que indica el cambio de polarización
acusado por el espécimen.
El microscopio en campo oscuro utiliza una luz muy
intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen. El campo de
visión del objetivo
se encuentra en la zona hueca del
cono de luz y sólo recoge la luz que se refleja en el objeto. Por ello las
porciones claras del
espécimen aparecen como un fondo oscuro y los
objetos minúsculos que se están analizando aparecen como una luz brillante sobre el fondo. Esta
forma de iluminación se utiliza para analizar elementos biológicos
transparentes y sin manchas, invisibles con iluminación normal.
El microscopio de fase ilumina el espécimen con un
cono hueco de luz, como
en el microscopio en campo oscuro. Sin embargo en el microscopio de fase el
cono de luz es más estrecho y entra en el campo de
visión del
objetivo, que contiene un dispositivo en forma de anillo que reduce la
intensidad de la luz y provoca un cambio de fase de un cuarto de la longitud de
onda. Este tipo de microscopio es muy útil a la hora de examinar tejidos vivos,
por lo que se utiliza con frecuencia en biología y medicina.
Entrelos microscopios avanzados se encuentran el microscopio de campo cercano,
con el que pueden verse detalles algo menores a la longitud de onda de la luz. Se hace pasar un haz de luz a
través de un orificio diminuto y se proyecta a través del
espécimen a una distancia equivalente a la mitad del
diámetro del
orificio, formando una imagen completa.
Microscopio electrónico (microscopia electrónica)
Utiliza haces de electrones y lentes electromagnéticas, consiguiendo un poder
de resolución de 100 Å (1Å = 10-10m), ampliando un objeto hasta 250.000 veces,
que mediante tratamiento óptico ó digital puede llegar hasta el millón de
aumentos.
La potencia amplificadora de un microscopio óptico
está limitada por la longitud de onda de la luz visible. El microscopio
electrónico utiliza electrones para iluminar un
objeto. Dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la
de la luz pueden mostrar estructuras mucho más
pequeñas. La longitud de onda más corta de la luz visible es de alrededor de
4.000 ángstroms (1 ángstrom es 0 metros).
La longitud de onda de los electrones que se utilizan en los microscopios
electrónicos es de alrededor de 0 ángstroms.
Todos los microscopios electrónicos cuentan con varios elementos básicos.
Disponen de un cañón de electrones que emite los
electrones que chocan contra el espécimen, creando una imagen aumentada. Se utilizan lentes magnéticas para crear campos que dirigen y
enfocan el haz de electrones. El sistema de vacío es una parte relevante
del
microscopio electrónico. Los electrones pueden ser desviados por las moléculas
delaire, de forma que tiene que hacerse un vacío casi
total en el interior de un microscopio de estas características. Por último,
todos los microscopios electrónicos cuentan con un
sistema que registra o muestra la imagen que producen los electrones.