Influencia del pH en la actividad enzimatica

Objetivo: Se sabe que la temperatura, el medio, la presión y el pH son todos variables que afectan la activad enzimatica.
Esta practica trata de realizar un estudio sobre la actividad enzimatica en diferentes pH, manteniendo las demas variables constantes.

Procedimiento
Se prepare el siguiente montaje:

Se trocea 3g de muslo de pollo y se vierte en el matraz del montaje. A continuación se echa al mismo matraz 2ml de NaCl de 2M y 4ml de solución tampón de un pH determinado. Se deja reposar el matraz con todo el contenido durante 5 minutos.
Una vez pasados los 5 minutos se echa 2ml de H2O2 en el matraz y lo cerramos con el corcho, poniendo el sistema en marcha. Durante el resto del experimento se va anotando el gas que se vaya acumulando el tubo de vidrio cada 30 segundos durante 10 minutos continuos.

Datos:
* Datos obtenidos por nuestro grupo
| pH = 5,3 | pH = 8,5 |
Tiempo (s) | Gas acumulado 1 experiencia (ml) | Gas acumulado 2 experiencia (ml) | Gas acumulado1 experiencia (ml) | Gas acumulado 2 experiencia(ml) |
0,30 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 |
1,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 |
1,30 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 |
2,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 |
2,30| 2,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 |
3,00 | 3,50 | 1,70 | 0,00 | 1,10 |
3,30 | 3,50 | 3,10 | 0,00 | 1,10 |
4,00 | 5,50 | 3,10 | 0,00 | 1,10 |
4,30 | 5,50 | 5,20 | 0,00 | 1,10 |
5,00 | 6,70 | 5,20 | 0,00 | 1,10 |
5,30 | 8,20 | 6,70 | 1,00 | 1,10 |
6,00 | 9,40 | 6,70 | 1,00 | 1,10 |
6,30 | 9,40 | 7,80 | 1,00 | 1,10 |
7,00 | 10,60 | 8,40 | 2,40 | 1,10 |
7,30 | 11,70 | 10,40 | 5,10 | 1,10 |
8,00 | 11,70 | 10,40 | 6,40 | 1,10 |
8,30 | 13,00 | 11,20 | 7,80 | 1,10 |
9,00 | 13,00 | 12,70 | 10,20 | 2,30 |
9,30 | 13,00 | 12,70 | 11,80 | 3,20 |
10,00 | 14,30 | 13,20 | 12,80 | 5,90 |
| (±0,01) |

pH | Gas acumulado exp.1 (ml) | Gas acumulado exp.2 (ml) | Media (ml) |
5,3 | 14,30 | 13,2 | 13,75 |
8,5 | 12,80 | 5,90 | 9,35 |
(±0,01) |
* Datos obtenidos por los demas grupos
pH | Gas acumulado exp.1 (ml) | Gas acumulado exp.2 (ml) | Media (ml) |
8,5 | 12,90 | 7,00 | 9,95 |
5,9 | 5,00 | 15,90 | 12,95 |
(±0,01) |

pH | Gas acumulado exp.1 (ml) | Gas acumulado exp.2 (ml) | Media (ml) |
7 18,70 | 16,55 |
5,3 | 11,90 | 14,50 | 13,20 |
(±0,01) |

* Procesamiento de datos

Ilustración [ 1 ] Grafica que muestra el gas obtenido a medida que aumenta el Ph

Conclusión y Evaluación:
Lacatalasa es un enzima que existe en los peroxisomas, organulos de membrana de las células eucariotas. Cuando el medio existe un exceso de agua oxigenada, los peroxisomas sueltan estas enzimas para poner fin poner fin al problema dado que rompen el agua oxigenada para formas oxigeno y agua. La reacción es la siguiente

En este experimento hemos usado muslo de pollo para proporcionar los peroxisomas con catalasa. Al añadir agua oxigenada al medio, las catalasas se han liberado para romperlo y reducir la cantidad de agua oxigenada, produciendo O2 en el proceso. Para saber como ha influenciado el Ph en la reacción se ha recogido éste gas como indicador de la actividad enzimatica. Cuanto mas gas se desprenda, mas actividad enzimatica hay.
* Conclusión
Observando los datos recogidos, y analizando la grafica, se ve que existen varios altibajos que no permiten establecer una relación clara y precisa entre el pH y la actividad enzimatica. Aun así , si se estudia la grafica de forma muy general y por encima, se puede decir que los enzimas actúan mejor en los pH acidos/nuestros que en medios alcalinos.
* Evaluación de la practica y errores
Personalmente creo que se podría haber mejorado mucho y me he quedado muy insatisfecho con losresultados. Los datos que se han recogido no han sido muy precisos y poco fiables, y el sistema no ha sido el mejor.
Para mejorar este experimento creo que es necesario ser mucho mas riguroso a la hora de trabajar. Tomar las medidas correctas en este experimento es muy importante ya que pueden influenciar mucho en los resultados obtenidos de las cuales se depende para sacar conclusiones con sentido. Creo que todos hemos fallado un poco en este aspecto.
El sistema aunque, esté bien pensado, no es muy bueno en cuanto se aplica a la practica. El montaje que se ha preparado no he dejado pasar el gas desprendido con fluidez por el tubo, impidiendo de esa forma poder calcular cuanto se desprendía por minuto. También ha hecho que se acumule mucho gas aparte de no dejarlo pasar bien, y esto pudo haber afectado el resultado final.
Aunque no creo que el pollo haya presentado gran problema, también nos tendríamos que haber asegurado de que todos lo habíamos picado de la misma forma.
Y por último, se debería experimentar con los pH distintos la misma cantidad de veces en total. No es valido que se haga una media de dos datos que hemos obtenido sobre un pH y compararlo con una media que se ha hecho de 4 datos que se ha obtenido de otro pH.