• Platano
• Agua destilada
• Mortero
• Cuchara chica
• Cuchara grande
• Shampoo
• Dos pizcas de sal
• Vaso plastico
• Trozo de gasa
• Tubo de ensayo
• Alcohol frío
• Pipeta
• Delantal
Procedimiento.
1. Escoger un tejido vegetal (en este caso
platano).
2. Alistar los instrumentos y materiales.
3. Pesar en la balanza 30gr del tejido vegetal escogido.
4. Mezclar en el mortero los 30gr de tejido vegetal y agregar un vaso de agua destilada. Moler por 15 a
20 segundos hasta obtener una mezcla homogénea, luego, mezclar bien la
solución con una cuchara.
5. Mezclar en un vaso plastico una cucharadita
de shampoo y dos pizcas de sal. Agregar 20ml de agua
destilada. Disolver la sal y el shampoo mezclando
lentamente con una cuchara para evitar que se produzca espuma.
6. Agregar a la mezcla de sal y shampoo, una cucharada de la mezcla del
tejido vegetal con agua. Después mezclar la
solución por 5 a 10 minutos sin producir espuma.
7. Mientras se mezcla la solución, otra compañera coloca la gasa
en un vaso plastico en forma de filtro.
8. Filtrar la mezcla, hasta obtener aproximadamente 5ml
9. Llenar un tubo de ensayo con alcohol frío.
10. Llenar la pipeta con la solución filtrada
11. Agregar lasolución al alcohol, dejandolo
reposar por 2 a 3 minutos.
12. Tomar nota de lo observado y responder el cuestionario.
Observaciones.
• Al obtener la última solución hemos observado que los
componentes se separan, quedando el alcohol en el inferior de la probeta y la
solución de platano + agua destilada en la superficie.
• Al no disponer de los materiales necesarios (varilla) no nos fue
posible realizar la observación de la hebra de ADN, sólo pudimos
apreciar la zona de la probeta donde se encontraba la hebra de ADN sin
condensar.
• La capa superior de la solución dentro de la probeta, en la cual
se encuentra el ADN tiene una apariencia blanquecina y lechosa.
• La parte inferior de la solución es transparente e incolora,
compuesta principalmente por el alcohol frío y el agua destilada.
Analisis de resultados.
a) ¿Qué papel juegan el detergente y la juguera en la primera
etapa de la extracción?
R: En nuestro caso no era juguera sino un mortero, y
este tiene el papel de romper la pared celular y la membrana plasmatica
para poder acceder al núcleo de la célula. Y el
detergente emulsiona los lípidos de las membranas nucleares y las
rompen, dejando libre al ADN.
b) ¿Qué habría pasado siantes de agregar la
solución de ADN al alcohol, lo hubieran agitado fuertemente ¿Por qué?
R: El alcohol se utiliza para concentrar el ADN, ya que éste es soluble
en agua. Si hubiésemos agitado la solución de ADN antes de
agregar el alcohol, el ADN se habría diluido por completo en el agua,
siendo de esta forma, imposible observar la hebra.
c) ¿De qué estara compuesto el precipitado blanco
obtenido, en el que se encuentra el ADN
¿Contendra otras porciones celulares? Expliquen.
R: El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro, ya
que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Ademas
al no ser una extracción profesional, siempre quedaran residuos
de algún otro componente celular.
d) ¿Difiere el contenido de ADN obtenido por cada grupo ¿A qué creen que se deben estas
diferencias?
R: Si, difieren. En primer lugar porque los tejidos vegetales
utilizados variaron (platano, kiwi, tallo de apio y flor de
brócoli). En segundo lugar, depende el tiempo
que fue molida la solución, lo que pudo ocasionar que el ADN se rompiera
y no fuera observable, y también si es que se produjo espuma al agregar
el lavalozas o shampoo. Por último, también una variable a
considerar es latemperatura del alcohol (mientras mas
frío, mejores resultados), por lo cual, si un alcohol se encontraba a
temperatura ambiente los resultados no serían muy claros.
Conclusión.
Concluimos gracias a este laboratorio, que el ADN
cumple una función vital en nuestro organismo, ya que es la
molécula portadora de la información genética, que da
todas las características a un individuo. En este laboratorio, nuestro
objetivo principal era la extracción de la hebra de ADN de un tejido
vegetal, pero debido a la ausencia de algunos materiales, que no nos fueron
proporcionados, el objetivo principal no pudo ser llevado a cabo por completo.
Es por esto, que el objetivo principal del laboratorio debió ser
ajustado, convirtiéndose en la observación de la zona donde se
ubica el ADN del tejido vegetal.
Nuestra solución fue exitosa, ya que la hebra de ADN quedó en la
zona superior, separada del
alcohol y del
agua destilada. Esto lo podemos afirmar, observando la sustancia blanquecina y
lechosa que cubría la superficie de nuestra probeta, la cual
tenía como
contenido principal el material genético celular (ADN), y también
como producto
filamentoso se encontraban fragmentos de ARN.
Cabe decir, que este proceso fuellevado a cabo
exitosamente gracias a la acción conjunta de muchas sustancias que
cumplían determinadas funciones, con el objetivo principal de obtener
una mejor observación de la hebra de ADN.
1° Los jabones utilizados como lavavajillas emulsionan los
lípidos de las membranas celulares y las rompen.
2º La sal evita la unión de las
proteínas al ADN.
3º Para aislar
el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es
soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita
en la interfase entre el alcohol y el agua. Ademas
de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes
celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.
Finalmente, concluimos que la extracci&oacut
e;n de ADN requiere una serie de
etapas basicas: En primer lugar tiene que romperse la pared celular y la
membrana plasmatica para poder acceder al núcleo de la
célula. A continuación debe romperse también la membrana
nuclear para dejar libre el ADN. Sólo siguiendo cuidadosamente este procedimiento y gracias a la acción de otras
sustancias (detergente, alcohol, sal, agua destilada) se puede llegar a
observar un poco mas de cerca la molécula que permite el
desarrollo y el fenómeno de la vida.