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Extraccion de adn de una célula vegetal - Alistar los instrumentos y materiales, Observaciones



• Platano
• Agua destilada
• Mortero
• Cuchara chica
• Cuchara grande
• Shampoo
• Dos pizcas de sal
• Vaso plastico
• Trozo de gasa
• Tubo de ensayo
• Alcohol frío
• Pipeta
• Delantal

Procedimiento.

1. Escoger un tejido vegetal (en este caso platano).
2. Alistar los instrumentos y materiales.
3. Pesar en la balanza 30gr del tejido vegetal escogido.
4. Mezclar en el mortero los 30gr de tejido vegetal y agregar un vaso de agua destilada. Moler por 15 a 20 segundos hasta obtener una mezcla homogénea, luego, mezclar bien la solución con una cuchara.
5. Mezclar en un vaso plastico una cucharadita de shampoo y dos pizcas de sal. Agregar 20ml de agua destilada. Disolver la sal y el shampoo mezclando lentamente con una cuchara para evitar que se produzca espuma.


6. Agregar a la mezcla de sal y shampoo, una cucharada de la mezcla del tejido vegetal con agua. Después mezclar la solución por 5 a 10 minutos sin producir espuma.
7. Mientras se mezcla la solución, otra compañera coloca la gasa en un vaso plastico en forma de filtro.
8. Filtrar la mezcla, hasta obtener aproximadamente 5ml
9. Llenar un tubo de ensayo con alcohol frío.
10. Llenar la pipeta con la solución filtrada
11. Agregar lasolución al alcohol, dejandolo reposar por 2 a 3 minutos.
12. Tomar nota de lo observado y responder el cuestionario.

Observaciones.

• Al obtener la última solución hemos observado que los componentes se separan, quedando el alcohol en el inferior de la probeta y la solución de platano + agua destilada en la superficie.

• Al no disponer de los materiales necesarios (varilla) no nos fue posible realizar la observación de la hebra de ADN, sólo pudimos apreciar la zona de la probeta donde se encontraba la hebra de ADN sin condensar.

• La capa superior de la solución dentro de la probeta, en la cual se encuentra el ADN tiene una apariencia blanquecina y lechosa.

• La parte inferior de la solución es transparente e incolora, compuesta principalmente por el alcohol frío y el agua destilada.

Analisis de resultados.

a) ¿Qué papel juegan el detergente y la juguera en la primera etapa de la extracción?

R: En nuestro caso no era juguera sino un mortero, y este tiene el papel de romper la pared celular y la membrana plasmatica para poder acceder al núcleo de la célula. Y el detergente emulsiona los lípidos de las membranas nucleares y las rompen, dejando libre al ADN.

b) ¿Qué habría pasado siantes de agregar la solución de ADN al alcohol, lo hubieran agitado fuertemente ¿Por qué?

R: El alcohol se utiliza para concentrar el ADN, ya que éste es soluble en agua. Si hubiésemos agitado la solución de ADN antes de agregar el alcohol, el ADN se habría diluido por completo en el agua, siendo de esta forma, imposible observar la hebra.

c) ¿De qué estara compuesto el precipitado blanco obtenido, en el que se encuentra el ADN ¿Contendra otras porciones celulares? Expliquen.

R: El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro, ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Ademas al no ser una extracción profesional, siempre quedaran residuos de algún otro componente celular.

d) ¿Difiere el contenido de ADN obtenido por cada grupo ¿A qué creen que se deben estas diferencias?

R: Si, difieren. En primer lugar porque los tejidos vegetales utilizados variaron (platano, kiwi, tallo de apio y flor de brócoli). En segundo lugar, depende el tiempo que fue molida la solución, lo que pudo ocasionar que el ADN se rompiera y no fuera observable, y también si es que se produjo espuma al agregar el lavalozas o shampoo. Por último, también una variable a considerar es latemperatura del alcohol (mientras mas frío, mejores resultados), por lo cual, si un alcohol se encontraba a temperatura ambiente los resultados no serían muy claros.

Conclusión.

Concluimos gracias a este laboratorio, que el ADN cumple una función vital en nuestro organismo, ya que es la molécula portadora de la información genética, que da todas las características a un individuo. En este laboratorio, nuestro objetivo principal era la extracción de la hebra de ADN de un tejido vegetal, pero debido a la ausencia de algunos materiales, que no nos fueron proporcionados, el objetivo principal no pudo ser llevado a cabo por completo. Es por esto, que el objetivo principal del laboratorio debió ser ajustado, convirtiéndose en la observación de la zona donde se ubica el ADN del tejido vegetal.

Nuestra solución fue exitosa, ya que la hebra de ADN quedó en la zona superior, separada del alcohol y del agua destilada. Esto lo podemos afirmar, observando la sustancia blanquecina y lechosa que cubría la superficie de nuestra probeta, la cual tenía como contenido principal el material genético celular (ADN), y también como producto filamentoso se encontraban fragmentos de ARN.

Cabe decir, que este proceso fuellevado a cabo exitosamente gracias a la acción conjunta de muchas sustancias que cumplían determinadas funciones, con el objetivo principal de obtener una mejor observación de la hebra de ADN.

1° Los jabones utilizados como lavavajillas emulsionan los lípidos de las membranas celulares y las rompen.

2º La sal evita la unión de las proteínas al ADN.

Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. Ademas de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.

Finalmente, concluimos que la extracci&oacut e;n de ADN requiere una serie de etapas basicas: En primer lugar tiene que romperse la pared celular y la membrana plasmatica para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Sólo siguiendo cuidadosamente este procedimiento y gracias a la acción de otras sustancias (detergente, alcohol, sal, agua destilada) se puede llegar a observar un poco mas de cerca la molécula que permite el desarrollo y el fenómeno de la vida.


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