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Prueba de benedict - que es la glucosa?, hermann vonfehling, identificacion y cuantificacion de azucares
PRUEBA DE BENEDICT
En química, la reacción o prueba de Benedict identifica
azúcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C anomérico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y
celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul
a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color
rojo-naranja.
El reactivo de Benedict consta de
Sulfato cúprico;Citrato de sodio;Carbonato Anhidro de Sodio,
ademas se emplea NaOH para alcalinizar el medio.
El fundamento de esta reacción radica en que en un
medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico)
es capaz de reducirse por efecto del
grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion
se observa como
un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal,
puesto que el azúcar en solución forma un
anillo de piranósico o furanósico. Una vez que
el azúcar esta lineal, su grupo aldehído puede reaccionar
con el ion cúprico en solución.
En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una
cetohexosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en
que se realiza la prueba: en un medio alcalino
caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario
enólico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico).
Los disacaridos como
la sacarosa (enlace 1 → 2)O) y
latrehalosa (enlace α(1→1)O), no dan positivo puesto que sus OH del
C anoméricos estan siendo utilizados en el enlace
glucosídico.
En resumen, se habla de azúcares reductores cuando
tienen su OH del C anomérico libre, y éstos son los que dan
positivo en la prueba de Benedict.
QUE ES LA GLUCOSA?
La glucosa es un carbohidrato simple, y es la unidad
de energía mas basica para las plantas y los animales.
Estructuralmente, la glucosa es un azúcar de
seis carbonos que tiene un aldehído en un extremo en su forma lineal (no
cíclica). Todos los alimentos que comemos eventualmente se convierten, o
son sintetizados, a través de una serie de reacciones
metabólicas, en glucosa, la cual es usada o almacenada como energía.
Las plantas aprovechan la energía del sol y sintetizan glucosa a través del proceso de
fotosíntesis.
Cómo funciona la solución de Benedict
La solución de Benedict es de color azul claro porque contiene sulfato
de cobre. Cuando se mezcla y se calienta con un azúcar, como la
glucosa, la cual tiene electrones disponibles para donar, el cobre acepta estos
electrones y se reduce, con lo cual se vuelve marrón anaranjado. Durante
este proceso, el ion cobre azul (II) se reduce a ion
cobre rojo (I). Mientras que el cobre se reduce, la glucosa dona
un electrón y se oxida. Como la glucosa
es capaz de reducir al cobre en la solución de Benedict, la llamamos
azúcar reductor.
Una forma rapida paraprobar la presencia de glucosa en una muestra es
agregar solución de Benedict, un reactivo con
cobre. La solución de Benedict es un
líquido de color azul claro en su estado puro, pero cuando se agrega a
la glucosa y se calienta, se vuelve marrón anaranjado. La
solución de Benedict también puede detectar la presencia de otros
azúcares de estructura similar. La solución de Benedict en estado
puro es de color azul claro.
1. Prueba de Benedict
Algunos azúcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes
oxidantes suaves como
el ion Fe3+ o Cu2+. Esta característica radica en la
presencia de un grupo carbonilo libre, el cual es
oxidado y genera un grupo
carboxilo. Por lo tanto, aquellos azúcares con un
grupo carbonilo libre son
llamados azúcares reductores y aquellos en los que el grupo carbonilo se
encuentra combinado en unión glicosídica se conocen como azúcares no
reductores. Existen varias reacciones químicas que permiten determinar
si se esta
en presencia de un azúcar reductor o no. La
prueba de Benedict es una de ellas y
se basa precisamente en la reacción o no de un azúcar con el ion
Cu2+. El reactivo
EJEMPLO DE Determinación de glucosa en orina.
Principio.
La Glucosa es una sustancia reductora, la cual reduce al sulfato cúprico
(color azul), de la solución de Benedict , a
óxido cúprico (color rojo) que es insoluble.
Método.
1. Con una pipeta depositar 5mL de solución de Benedict en un tubo de ensayo.
2. Agregar 8 gotas de orina y mezclar completamente.
3. Hervir durante 2 minutos.
4. Dejar enfriar la muestra a temperatura ambiente.
5. Examinar la muestra y ver si existe algún cambio de color o
precipitado.
Resultados.
Color
Resultado
Concentración mmol/L*
Azul
Verde
Verde con precipitado amarillo
Desde amarillo
hasta verde oscuro
Castaño
Desde anaranjado hasta rojo ladrillo
Negativo
Huellas
+
++
+++
++++
0
14
28
56
83
111 ó mas
*Dividir el resultado por 0.055 para convertirlo a mg/dL
Reactivo de Benedict.
1. Disolver los cristales de sulfato cúprico por
calentamiento en 100 mL de agua destilada (solución A)
2. Disolver el citrato trisódico y el carbonato
sódico aproximadamente en 800 mL de agua (Solución B).
3. Añadir la solución A lentamente a la
solución B, removienco constantemente.
4. Completar a 1000 mL.
Determinación de pigmentos biliares en orina.
Principio.
Cuando se añade yodo (solución de Lugol) a la orina que contenga
pigmentos biliares se forma un complejo verde.
Método
1. Colocar 4 mL de orina
2. Agregar 4 gotas de lugol
3. Agitar el Tubo y Observar.
Resultados.
Verde Palido: +
Verde Intenso: ++
Amarillo Castaño: Negativo
PRUEBA FEHLING
HERMANN VONFEHLING (1811-1885)Datos biograficos
Farmacéutico y químico aleman que en 1827 entra a trabajar
como aprendiz en unafarmacia de Lübeck, Entre 1835 y 1837 se dedica a
estudiar química en Heidelberg
siendo designado miembro de la Comisión de Patentes, y publicando
entonces su famosa obra “Determinación cuantitativa de
azúcar en la orina” (1848), basada en el uso del reactivo de su
nombre.
Reactivo de Fehling
El reactivo de Fehling, también conocido como Licor de Fehling y que se utiliza como reactivo para la
determinación de azúcares reductores.
Sirve para demostrar la presencia de glusosa, así como para detectar derivados de ésta
tales como la
sacarosa o la fructosa. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas
Sulfato de cobre cristalizado, 35 g y agua destilad hasta 1.000 mL.
Sal de Seignette o Tartrato mixto de potasio y sodio 150 g, solución de
hidróxido de sodio al 40 %, 3 g y agua hasta 1.000 mL.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso,
para evitar la precipitación del
hidróxido de cobre.
El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del
grupo carbonilo de los aldehídos. Éste se oxida a acido y reduce la sal de cobre en medio alcalino a
óxido de cobre, formando un precipitado de color rojo.
Un aspecto importante de esta reacción es que
la forma aldehído puede detectarse facilmente aunque exista en
muy pequeña cantidad. Si un azúcar
reduce el licor de Fehling a óxido de cobre rojo, se dice que es un
azúcar reductor. Al reaccionar conmonosacaridos se torna verdoso, y si
lo hace con disacaricos toma el color del ladrillo.Por
ebullición se decolora el reactivo. Un cc. de
reactividad corresponde a 0’005 gr. de glucosa.
Esta reacción se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos
compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un
grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehído dando lugar a un
falso positivo
IDENTIFICACION Y CUANTIFICACION DE AZUCARES
.
. La presencia de algún azúcar se manifiesta formando un precipitado color rojo ladrillo que en
EJEMPLOñ
Los productos alimenticios pueden analizarse para determinar si contienen
azúcares reductores mediante pruebas conocidas como prueba Fehling. Esta prueba
también puede utilizarse para determinar si los azúcares
estan presentes en ciertos fluidos corporales, como la orina, lo
cual es importante para realizar pruebas de diagnóstico.
Diferencias entre azúcares reductores y no reductores
¿Qué es un azúcar reductor?
Cualquier azúcar que forme un aldehído o
cetona en presencia de una solución alcalina es un azúcar
reductor. Los tipos de azúcares reductores son
glucosa, fructosa, gliceraldehído, lactosa, maltosa y arabinosa. Las sacarosas y las trehalosas no son azúcares reductores.
En definitiva, un azúcar reductor es un tipo de
azúcar que reduce ciertos productos químicos a través de
una reacción de oxidación.
Prueba Fehling
Para realizar laprueba de Fehling, la
solución se diluye en agua y se calienta hasta que se disuelve
completamente. A continuación, se añade
una solución de Fehling mientras se revuelve. Si hay
azúcares reductores, la solución debería comenzar a
cambiar los colores de la forma del precipitado a rojo o
herrumbre. Si no existen azúcares reductores, la
solución permanecera azul o verde.
Cómo funciona la prueba Fehling
La solución de Fehling se realiza haciendo primero dos subsoluciones.
La solución A es de pentahidrato de sulfato de
cobre (II) disuelto en agua y la solución B contiene potasio sodio
tartrato tetrahidratado (sal de Rochelle) e hidróxido de sodio en agua. Las dos soluciones se suman en partes iguales para hacer la
solución de la prueba final. La prueba es un
método de detección de monosacaridos,
específicamente aldosas y cetosas. Estos se detectan cuando el
aldehído se oxida a acido y forma un
óxido cuproso. Al entrar en contacto con un
grupo aldehído, se reduce a ión cuproso, que forma el precipitado
rojo e indica la presencia de azúcares reductores.
Aplicaciones practicas
Las pruebas de azúcar reductor de Fehling se pueden utilizar para
determinar si los azúcares estan presentes en la orina, que puede
ser indicativo de la diabetes mellitus. También permiten de
manera cualitativa, como
en un experimento de valoración, determinar la cantidad de la
reducción de azúcares en una solución.
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