Para el diagnóstico de
la sífilis, tradicionalmente, se cuenta con tres grupos de pruebas. Por examen directo mediante microscopía en campo oscuro y
por fluorescencia directa, mediante serología y por cultivo en
células epiteliales de conejo. Por serología se tienen dos
tipos de pruebas, las pruebas no treponémicas como VDRL y RPR (Rapid plasma reagin) y las
pruebas treponémicas como como MHA-TP
(Microhemaglutinación para T pallidum).
OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS
Para la microscopia en campo oscuro, la
muestra debe ser fluido seroso libre de eritrocitos y residuos de tejidos o
puede ser materia¡ obtenido por aspiración de ganglio; se limpia
la lesión con solución salina, sólo si estuviera
contaminada. Puede ser necesario realizar una abrasión leve de la
lesión, para obtener fluido seroso, el cual se coloca directamente en
una lamina, la que debe examinarse antes de transcurridos 20 minutos, ya
que el Treponema pallidum es muy sensible al oxígeno, calor, cambios de
pH y desecación. Nunca se debe tomar para campo oscuro muestras de
cavidad oral, o anal debido a la contaminación con espiroquetas no
patógenas.
Para la fluorescencia directa se obtiene la muestra de manera similar
que la descrita para el campo oscuro, pero se deja secar al medio ambiente.
MICROSCOPIA DE CAMPO OSCURO
La microscopía de campo oscuro es la prueba de elecciónpara la
sífilis primaria sintomatica. Los treponemas,
morfológicamente, son espiroquetas muy delgadas y helicoidales, estos
gérmenes son tan delgados, que no pueden ser
observadas en un microscopio de luz a campo normal, y es necesario un
microscopio que tenga campo oscuro. El T. pallidum se diferencia de otros
microorganismos espiralados porque son mas delgados,
sus espirales son muy regulares y presentan un movimiento característico
en tirabuzón. Cuando se obtiene hallazgos positivos al
campo oscuro, se debe realizar obligatoriamente pruebas serológicas
confirmatorias.
PRUEBAS SEROLÓGICAS
Se denomina pruebas serológicas a las realizadas sobre el suero, uno de
los componentes de la sangre, para detectar anticuerpos.
Las pruebas serológicas son de dos tipos: no-treponémicas y
treponémicas. Las pruebas no treponémicas son usadas para
despistaje, son económicas y, también, sirven para evaluar la
eficacia del
tratamiento. Las pruebas treponémicas emplean como antígeno
al T. pallidum y detectan anticuerpos específicos. Se le utiliza para
verificar cuando las pruebas no-treponémicas son reactivas o como
pruebas confirmatorias. Existen varias técnicas serologicas que se
utilizan dependiendo de los anticuerpos de los cuales se sospecha entre las que
se pueden mencionar aglutinación, precipitación, fijación del
complemento, anticuerposfluorescentes y otras.
RUEBAS NO TREPONÉMICAS
Las pruebas no-treponémicas incluyen el VDRL (Venereal Disease Research
Laboratory, RPR (Rapid plasma reagin), USR (Unheated-serum reagin).
Todas estas pruebas estan basadas en antígenos en solución
alcohólica, que contienen cardiolipina, colesterol y lecitina purificada
(un fosfolípido). Estas
pruebas detectan anticuerpos antilipoídeos. Que aparecen como respuesta a los
antígenos lipoideos que estan presentes en la treponema, aunque
no sean específicos del
mismo.
Antígeno: sustancia que estimula la producción de anticuerpos en
el interior del
organismo.
VDRL
(Venereal disease research laboratory)
Se realiza calentando el suero, luego se mezcla con el complejo reaginina
purificado y se observa en el microscopio la aglutinación;
posteriormente los resultados reactivos se someten a diluciones seriadas a cada
dilución se le realiza la prueba de VDRL y se registra el titulo
maximo obtenido. para reportar el título
(1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, etc.) Esta prueba se puede realizar en
lamina y ser observada al microscopio como un precipitado
de partículas finas (floculación), o se puede realizar en un tubo
de ensayo y ser leída macroscópicamente.
Esta prueba se puede realizar en lamina y ser observada al microscopio como
un precipitado de partículas finas (floculación), o se puede
realizar enun tubo de ensayo y ser leída macroscópicamente.
RPR (reaginina rapida en plasma
Se denomina reagina a una proteína similar a un anticuerpo, que se une a
un antígeno, como
pueden ser la cardiolipina y la lecitina en las pruebas no-treponémicas,
y se denomina anticuerpos reagínicos.
Anticuerpo: Es una proteína producida por el sistema inmunitario del
cuerpo cuando detecta sustancias dañinas, llamadas antígenos. Los
ejemplos de antígenos abarcan microorganismos (tales como bacterias, hongos,
parasitos y virus) y químicos.
La prueba de reagina rapida en plasma (RPR) mide los anticuerpos,
llamados reaginas, que pueden ser producidos por el Treponema pallidum, la
bacteria que causa la sífilis. La muestra se mezcla con una
suspensión que posee cardiolipina, lecitina y colesterol en
partículas de carbón. Si la muestra es positiva se observa
pequeños grumos negros (floculación). El
resultado se reporta como reactivo o no reactivo; todos
aquellos reactivos deben ser diluidos seriadamente para realizar la
titulación, y se reporta la dilución mas alta que exhibe
reacción.
PRUEBA TREPONEMICAS
Se usan para confirmar la existencia de infección después de una
VDRL o RPR.
MHATP Hemaglutinación del Treponema
Palido).
Esta prueba usa
como antígeno el treponema pallidum y
detectan anticuerpos contra los componentes celulares del treponema.
