PEROXIDASA Y POLIFENOL OXIDASA

RESULTADOS Y OBSERVACIONES

Se rayo una papa a tal grado de obtener finalmente una pulpa, pero hay que cuidar de mantener la pulpa a temperaturas bajas. Esta pulpa se disuelve con 100ml de agua destilada y se deja reposar durante 15 min. En un baño de agua fría, después se filtro la mezcla y se dejo reposar el filtrado 5 min. Para dejar que se asiente el almidón en elfondo. Se decanto el liquido para desechar el almidón y se regreso el liquido al baño d hielo para obtener como producto final el llamado “extracto de papa”.

TUBO · 1: 0.5 ml de catecol al 1% + 5 ml de extracto de papa
A los 2 min.: color café claro
Alos 5 min.: café fuerte

TUBO · 2: : 0.5 ml de catecol al 1% + 5 ml de extracto de papa + 0.5ml de H2O2 al 3%
Los 2 min.: formo espuma
Alos 5 min.: café fuerte

TUBO · 3: 0.5 ml de catecol al 1% + 5 ml de extracto de papa (sometida a calor antes)

Los 2 min.: café tamarindo
Alos 5 min.: café fuerte


TUBO · 4: 0.5 ml de catecol al 1% + 5 ml de extracto de papa (sometido a calor antes) + 0.5ml de H2O2 al 3%
Los 2 min.: café tamarindo
Alos 5 min.: café fuerte

TUBO · 5: 0.5 ml de pirogalol al 1% + 5 ml de extracto de papa
Los 2 min.: café tamarindo
Alos 5 min.: café tamarindo

TUBO · 6: 0.5 ml de pirogalol al 1% + 5 ml de extracto de papa + 0.5ml de H2O2 al 3%
Los 2 min.: café tamarindo
Alos 5 min.: café oscuro

TUBO · 7: .5 ml de pirogalol al 1% + 4 gotas de cianuro de sodio al 5% + 5 ml de extracto de papa
Los 2 min.: café claro
Alos 5 min.: café oscuro

TUBO · 8: 5 ml de pirogalol al 1% + 4 gotas de cianuro de sodio al 5% + 5 ml de extracto de papa + 0.5ml de H2O2 al 3%
Los 2 min.: café claro
Alos 5 min.: café oscuro
TUBO · 9: 2 ml de tirosina al 1% + 5 ml d extracto de papa
A los 2 min.: salmón
Alos 5 min.: salmón

TUBO · 10: 2 ml de tirosina al1% + 5 ml d extracto de papa + 0.5ml de H2O2 al 3%
A los 2 min.: formó espuma y cambio a de color a café claro
Alos 5 min.: formo espuma y cambio a color café oscuro

TUBO · 11: 0.5 ml de catecol al 1 % + .05 ml de H2O2 + agua destilada
A los 2 min.: formó espuma y cambio a de color a café claro
Alos 5 min.: formo espuma

TUBO · 12: 0.5 ml de pirogalol al 1% + 0.5 ml de H2O2 + agua destilada
A los 2 min.: oscuro
Alos 5 min.: oscuro

TUB · 13: 5ml de extracto de papa
A los 2 min.: oscuro
Alos 5 min.: oscuro


CONCLUSIONES

Se demostró la acción o la actividad de las enzimas hidroperoxidasas: la catalasa y la peroxidasa y la poli fenol oxidasa, utilizando como fuentes de enzimas a la papa, dándole antes del experimento un tratado para obtener el extracto de papa pero este tratado se debe de dar a bajas temperaturas para evitar la oxidación antes de tiempo. Por lo tanto también en la practica se trabajo con algunos inhibidores de las reacciones de las enzimas como lo es el cianuro de sodio o el calor obteniendo en todos los tubos diferencias en los colores o en los matices pero todos llegaron a una oxidación, por lo tanto al llevar acabo esta practica reforzamos conocimientos teorías para un mayor aprendizaje.

CUESTIONARIO

1 sCuales son los productos de la reaccion de la peroxidasa dado que el substrato fuera un poli fenol?
H2O2 + SUB + PEROXIDASA  H2O + SUB. O
Las peroxidadas son enzimas que tienen comosubstrato el agua oxigenada la cual se descompone en agua y oxigeno, este ultimo por medio de una reaccion acoplada actúa sobre otro substrato susceptible de oxidación.

2 o-di fenol + O2 + poli fenol oxidasaïƒ -o-quinona + 2H2O
El poli fenol oxidasa es conocido también como la oxidasa de la patata cataliza la oxidación de los o-di fenoles en presencia de oxigeno molecular.

sQué diferencia hay entre las enzimas peroxidasa y poli fenol oxidasa?
Utilizando la ppal. Como fuente de enzimas la acción de la peroxidasa es mucho mas rápida que la acción de la poli fenol oxidasa .


ssupuesto que los 2 pueden venir en la misma fuente, como se pueden distinguir?
La peroxidasa actúa mas rápido que la otra.

sCuál es la razón de la diferencia de color con los diferentes substratos?
Los substratos que se utilizaron fueron el catecol la pirogalol y la tirosina, los 3 a la misma concentración y la peroxidasa actúa en el catenol, y la poli fenol oxidasa actúa sobe la pirogalol y la tirosina, las tres se oxidan y dan cambios de colores, pero al tener contacto con el cianuro este inhibe la acción de la enzima por esto las diferencias de colores o matices en los dif. Substratos.

spara que se añade agua oxigenada a la reaccion?
Es un substrato que se utiliza para transferir el O2 de los peróxidos a los substratos oxidables.

sque efecto tiene en el hígado la acción conjunta de la peroxidasa y la catalasa y que diferencia hay entre las2 enzimas?
La catalasa y la peroxidasa son hidroperoxidasas que se encuentran en los tejidos vegetales y animales comprenden la catálasas y las peroxidasas ambas, reaccionan con los mismos substratos pero de modo diferente. Las catalasas constituyen un grupo especial de peroxidasas que utilizan al H2O2 a l a vez como substrato y a la vez como aceptor y las peroxidasas el aceptor es un compuesto orgánico que catalasa en presencia de oxigeno, al combinarse las 2 forman un complejo substrato-fermento la cual no tiene ningún actividad enzimático.

sPor qué las manipulaciones para la preparación de de extracto de enzimas se llevan acabo bajo temperatura bajas?
Para evitar que una vez pelada la papa, el contacto con el oxigeno atmosférico haga que las enzimas comiencen a actuar sobre los sustratos normales de la papa y obtengamos un extracto ya muy oscuro antes de comenzar el experimento.