BACTERIOFAGO
(VIRUS DE BACTERIAS)
Los
virus son demasiado pequeños para poder ser vistos con el microscopio óptico y
únicamente son visibles gracias al mayor poder de resolución que ofrece el
microscopio electrónico. Los virus estan compuestos de un
genoma, bien en forma de DNA o RNA, y de proteínas. Son
parásitos obligados y necesitan de la maquinaria metabólica de la célula
huesped para la replicación de su material genético. En esencia un virus consta de ácido nucleico rodeado por una cubierta
de proteína, llamada cápsida.
Los bacteriófagos son virus de bacterias que presentan todas
las características de estructura y ciclo vital que presentan los virus
animales o vegetales. Se han descubierto
especies de bacteriófagos que atacan selectivamente a prácticamente todas las
bacterias importantes conocidas. El bacteriofago Lamba (λ
es uno de los bacteriófagos más estudiados de los específicos de E. coli. Infecta la
célula uniéndose al receptor de la maltosa (proteína que permite que la maltosa
entre en la célula) y una vez unido inyecta su ADN de cadenadoble en la célula
bacteriana. En el interior de la bacteria este
ADN puede o bien integrarse en el cromosoma bacteriano y sus genes quedan
reprimidos, o bien se expresar sus genes y sintetizar nuevos fagos. En el primer caso se habla de ciclo lisogénico y en el segundo de
ciclo lítico. Objetivo La presencia de virus pasaría
desapercibida a no ser por el hecho de que son agentes infecciosos y que se
hacen evidentes a través de los síntomas de las enfermedades que producen.
El objetivo de la práctica consiste en visualizar la
presencia de bacteriófagos a traves de las consecuencias de su ciclo
infeccioso. Material Dos placas de medio phage base
precalentadas a 37°C. Dos tubos de vidrio con 300 µl de bacterias
Staphylococcus aureus 8325-4 competentes diluídas en phage broth. 10 ml de phage top agar a 55 °C. Eppendorf con 200 µl del
fago φ 85 diluído en phage broth. Pipeta automática Pipeta de 5 ml estéril
Pipeteador automático Metodología Tomar un tubo con
300 µl de células competentes y añadirles 200 µl de una dilucion del fago. Mezclar por agitación. A partir de aquí, hacer lo mismo con
el tubo con 300 µl de células competentes al que no le hemos añadido el fago. Incubar 30 min a temperatura ambiente. Añadir
5 ml de phage top agar a 55 °C. IMMEDIATAMENTE mezclar
y añadir sobre la placa de phage base precalentada a 37°C. Dejar
solidificar y meter en la estufa a 37°C.
• - destrucción del microambiente
hematopoyético, que junto con la hematopoyesis extramedular condiciona
la liberación de células que no existirían normalmente
(cuadro leucoeritroblastico). Aparace anemia,
pancitopenia y cuadro leuoeritroblastico.
MIELOPTISIS
Mieloptisis o Sustitución Medular
La mieloptisis se define como
la infiltración de la MO por células no
hematopoyéticas, lo que resulta en diferentes grados de anemia,
trombocitopenia y neutropenia.
Desde 1935, Reich describió la presencia de células tumorales
metastasicas en el espacio medular, fenómeno que ocurre hasta en
el 30% de los pacientes con neoplasias avanzadas
Entre los tumores sólidos, las causas mas comunes de mieloptisis
son: el cancer de pulmón, mama, próstata, tiroides y el
carcinoma
de células claras de riñón.
Patogenia
Disminución del
espacio físico de la MO: al estar desplazada la
hematopoyesis normal por otras células que se han infiltrado.
Destrucción del microambiente hematopoyético,
que junto con la
hematopoyesis extramedular condiciona la liberación de células
que
no existirían normalmente (cuadroleucoeritroblastico). Aparece
anemia, bicitopenia o pancitopenia y cuadro leucoeritroblastico.
La demostración de mieloptisis en pacientes con
metastasis por cancer de mama o primario desconocido
se asocia con un pronóstico ominoso y con una
esperanza de vida inferior a los 70 y 18 días,
respectivamente.
No obstante, en pacientes con cancer de próstata la
mediana de la supervivencia después del diagnóstico de
leucoeritrobastosis parece ser mayor, oscilando entre
los siete y nueve meses; para el resto de las neoplasias
que se asocian con esta condición, se desconoce su
influencia sobre la evolución y la respuesta a diversos
tratamientos.
mieloptísica
Anemia causada por infiltración y sustitución del espacio medular normal por
células anómalas o no hematopoyéticas.
Las principales características de esta anemia son
normocromía, anisocitosis, poiquilocitosis y hematíes nucleados
en la extensión; también se observan células mieloides
inmaduras. Estos hallazgos aparecen cuando existe
sustitución de la médula por neoplasias infiltrativas,
enfermedades granulomatosas, enfermedades de depósito (lípidos) o
fibrosis.
Los términos descriptivos que se emplean en este
tipo de anemia pueden ser confusos. Metaplasia mieloide
significa hematopoyesis extramedular en el hígado, el bazo o los
ganglios linfaticos, que puede acompañar a la mieloptisis de
cualquier etiología. La mielofibrosis es la sustitución de
la médula por bandas de tejido fibroso, que puede ser idiopatica
o secundaria. Un término antiguo, metaplasia
mieloide agnogénica, indica mielofibrosis primaria con o sin
hematopoyesis extramedular. En algunas situaciones, la mielosclerosis
(neoformación ósea) se asocia a mielofibrosis.