lbuminaALBUMINA
La Albúmina, es un tipo de proteína simple, compuesta de carbono,
hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y un pequeño
porcentaje de azufre.
La albúmina es coagulable por el calor, los acidos minerales, el
alcohol y el éter, y es soluble en agua y en disoluciones diluidas de
sal. Es parte importante de la alimentación, y esta presente en
la clara de huevo, la leche, el músculo y el
plasma sanguíneo; también se produce en las plantas, especialmente
en las semillas. Puesto que la albúmina se coagula cuando se calienta a
71 °C, es útil para separar precipitados que enturbian disoluciones;
así se aclaran disoluciones en el refinado del azúcar y otros
procesos. La albúmina forma compuestos insolubles con muchas sales
metalicas, como
el cloruro de mercurio, el sulfato de cobre y el nitrato de plata.
La albúmina es una proteína que se encuentra
en gran proporción en el plasma sanguíneo, siendo la
principal proteína de la sangre y una de las mas abundantes
en el ser humano. Es sintetizada en el hígado.
La concentración normal en la sangre humana oscila entre 3 y 5,0 gramos por decilitro,1 y supone un 54,31% de
la proteína plasmatica. El resto de
proteínas presentes en el plasma se llaman en conjunto globulinas.
La albúmina es fundamental para el mantenimiento de
la presión osmótica, necesaria para la distribución
correcta de los líquidos corporales entre el compartimento intravascular
y el extravascular, localizado entre los tejidos.2 La albúmina
tiene carga eléctrica negativa. La membrana basal
del glomérulo renal, también esta cargada
negativamente, lo que impide la filtración glomerular de la
albúmina ala orina.2 En el síndrome
nefrótico, esta propiedad es menor, y se pierde gran cantidad de albúmina
por la orina.3
Debido a que pequeños animales como por ejemplo las ratas, viven con una
baja presión sanguínea, necesitan una baja presión
osmótica, también necesitan una baja cantidad de albúmina
para mantener la distribución de fluidos.
Si efectuamos una electroforesis de las proteínas del
suero a un pH fisiológico, la proteína albúmina es la que
mas avanza debido a su elevada concentración de cargas negativas
(obviando la pequeña banda llamada pre-albúmina, que la precede).
* Funciones de la albúmina en el organismo
*
Permite mantener la presión oncótica, fundamental para la
correcta distribución de los líquidos
corporales entre compartimento intravascular y el extravascular,
localizadoentre los tejidos.
* Transporta las hormonas tiroideas y las hormonas liposolubles.
* Transporta acidos grasos libres y la bilirrubina no conjugada.
* Transporta muchos farmacos.
* Controla el pH.
La concentración plasmatica de albúmina refleja la tasa de
síntesis, degradación y volumen de distribución. La
síntesis de albúmina esta regulada por una serie de
factores, incluyendo el estado nutricional, la presión oncótica del plasma, citokinas (como TNF e IL-1, que
disminuyen su síntesis) y hormonas. Se desconoce el
lugar de degradación de la albúmina. Su vida media es de
20 días aproximadamente; en un día, se
degrada un 4% del
pool total de albúmina.
La concentración plasmatica normal de albúmina es de 3 -5 g/dL. Las causas de hipoalbuminemia son:
disminución de la síntesis hepatica (por ejemplo en la
cirrosishepatica), inflamación sistémica, síndrome
nefrótico, desnutrición y trastornos genéticos (muy raro).
En casos de insuficiencia hepatica aguda no se observa
hipoalbuminemia, ya que la vida media de la albúmina es prolongada (20
días).
Los efectos secundarios después de la
administración de albúmina son raros. Reacciones
alérgicas leves como eritema, urticaria, fiebre y
nauseas generalmente desaparecen con la interrupción de la
terapia o la disminución de la velocidad de infusión. En casos aislados, esta reacción puede llegar a shock
anafilactico en cuyo caso la infusión se debe interrumpir
inmediatamente e iniciar el tratamiento adecuado. Cuando
se utilizan productos medicinales preparados desde plasma o sangre humana, las
enfermedades, debido a la transmisión de agentes infecciosos no puede
excluirse totalmente. Esto aplica a patógenos
todavía no conocidos en la naturaleza. Para minimizar estos riesgos,
se aplican controles estrictos en la selección de donantes de sangre.
Todo el plasma utilizado para la producción de
Albúmina 20% Octapharma es cuidadosamente controlado para detectar la
presencia de ALT, HBsAg, anti-HCV y anti-HIV. Después
del examen de cada donación el pool de plasma es testeado nuevamente.
Sólo si el resultado es negativo el plasma sera
utilizado en la producción de Albúmina 20% Octapharma. Por
otra parte el proceso de manufactura de Albúmina 20% Octapharma incluye
procesos de inactivación y/o remoción y el producto final es
pasteurizado a 60ºC durante 10 horas.
EJEMPLO FALTA DE ALBUMINA
La hipoalbuminemia (disminución de los niveles plasmaticos de
albúmina) pueden ser signo de un
dañohepatico crónico. Sin embargo, la disminución
de la albúmina no es específica de las enfermedades
hepaticas. Las principales causas de hipoalbuminemia son:
* Cirrosis hepatica: La disminución de la función
hepatica en la cirrosis hepatica de larga data produce
disminuciones de la albúmina que pueden ser marcadas y asociarse a edema
de extremidades y ascitis.
* Síndrome nefrósico (nefrótico): Se refiere a la
pérdida de albúmina por el riñón, frecuentemente
secundario a diabetes mellitus. El síndrome
nefrótico habitualmente se acompaña de elevaciones marcadas de
los lípidos sanguíneos y niveles variables de insuficiencia
renal.
* Enfermedades crónicas: Cualquier enfermedad crónica con
compromiso nutricional puede asociarse a hipoalbuminemia, por ejemplo
neoplasias, insuficiencia cardiaca y enfermedades
intestinales entre otras.
* Malabsorción: Las enfermedades que impiden la absorción
adecuada de nutrientes por tubo digestivo se asocian a desnutrición con
hipoalbuminemia.
Niveles elevados de albúmina
No se han descrito enfermedades específicas que
se asocien a niveles elevados de albúmina, por lo que su hallazgo en
examenes de rutina no es indicador de anormalidad, sino mas bien
es un hallazgo relativamente frecuente en personas jóvenes bien
nutridas.
AntecedentesLas soluciones de albúmina humana se
utilizan en una gran variedad de problemas clínicos y
quirúrgicos. Las indicaciones autorizadas son el tratamiento de
shock de emergencia y otras condiciones en las que es urgente la
reposición del
volumen sanguíneo, las quemaduras, y la hipoproteinemia. Las soluciones
de albúmina humana son mas costosas queotros coloides y
cristaloides.ObjetivosCuantificar el efecto sobre la mortalidad de la
albúmina humana y de la administración de fracción de
proteína plasmatica (FPP) en el tratamiento de pacientes en
estado crítico.Estrategia de búsquedaSe realizaron
búsquedas en el Registro de Ensayos del Grupo Cochrane de Lesiones, el Registro
Cochrane Central de Ensayos Controlados, MEDLINE, EMBASE y en el BIDS Index to
Scientific and Technical Proceedings. Se verificaron las
listas de referencia de los ensayos y los artículos de revisión,
y se estableció contacto con los autores de los ensayos identificados.
La búsqueda se actualizó por última vez en agosto de
2004.Criterios de selecciónEnsayos controlados aleatorios que compararon
albúmina/FPP con ninguna albúmina/FPP, o con una solución
cristaloide, en pacientes en estado crítico con hipovolemia, quemaduras
o hipoalbuminemia.Recopilación y analisis de datosSe obtuvieron
datos sobre los participantes, la solución de albúmina utilizada,
la mortalidad al final del seguimiento y la calidad del ocultamiento de la
asignación. El analisis se estratificó por tipo de
pacientes.Resultados principalesEsta revisión identificó 32
ensayos que cumplieron con los criterios de inclusión y reportaron la
muerte como
un resultado. Hubo 1632 muertes entre los 8452 participantes del ensayo.Para la
hipovolemia, el riesgo relativo de muerte posterior a la administración
de albúmina fue de 1,01 (intervalo de confianza del 95%: 0,92; 1,10).
Este calculo estuvo influido en gran medida por los resultados del
ensayo SAFE que proporcionó el 91% de la información (basada en
la ponderación del metanalisis).Para las quemaduras, el riesgo
relativo fue 2,40 (1,11; 5,19) y para la hipoalbuminemia el riesgo relativo fue
1,38 (0,94; 2,03). No había una heterogeneidad apreciable entre los
ensayos de las diversas categorías (ji cuadrado = 21 ;
gl = 25, p = 0,64). El riesgo relativo combinado de muerte con
administración de albúmina fue de 1
(0,95; 1,13)Conclusiones de los autoresNo existen pruebas de que la
albúmina reduzca la mortalidad comparada con opciones mas baratas
como la
solución salina en pacientes con hipovolemia. No existen pruebas de que
la albúmina reduzca la mortalidad en pacientes en estado crítico
con quemaduras e hipoalbuminemia. Todavía es
cuestionable la posibilidad de que existan poblaciones de pacientes altamente
seleccionados en estado crítico, a los cuales pueda indicarseles
la albúmina. Sin embargo, ante la ausencia de pruebas de un
beneficio de la albúmina en la mortalidad y el gran costo de la
albúmina comparada con otras alternativas como la solución
salina, parece razonable que la albúmina sólo se use en el
contexto del ensayo controlado aleatorio bien ocultado y de poder
estadístico adecuado |
|
DESNATURALIZACIÒN DE PROTEÌNAS 9.5
Las proteínas son macromoléculas formadas por cadenas lineales de
aminoacidos Las proteínas desempeñan un papel fundamental
en los seres vivos y son las biomoléculas mas versatiles y
mas diversas. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes,
entre las que destacan:
- estructural
- reguladora
- transportadora
- defensiva
- enzimatica
- contractil
Las proteínas de todo ser vivo estan determinadas
mayoritariamente por su genética (conexcepción de algunos
péptidos antimicrobianos de síntesis no ribosomal), es decir, la
información genética determina en gran medida qué
proteínas tiene una célula, un tejido y un organismo.
Las proteínas se sintetizan dependiendo de cómo
se encuentren regulados los genes que las codifican. Por
lo tanto, son suceptibles a señales o factores externos. El conjunto de las proteínas expresadas en una circunstancia
determinada es denominado proteoma.
Practicamente todos los procesos biológicos dependen de la
presencia o la actividad de este tipo de
moléculas. Bastan algunos ejemplos para dar idea de la
variedad y trascendencia de las funciones que desempeñan. Son
proteínas
- casi todas las enzimas, catalizadores de reacciones químicas en
organismos vivientes; muchas hormonas, reguladores de actividades celulares
- la hemoglobina y otras moléculas con funciones de transporte en la
sangre
- los anticuerpos, encargados de acciones de defensa natural contra infecciones
o agentes extraños
- los receptores de las células, a los cuales se fijan moléculas
capaces de desencadenar una respuesta determinada
- la actina y la miosina, responsables finales del acortamiento del
músculo durante la contracción
- el colageno, integrante de fibras altamente resistentes en tejidos de
sostén.
Las proteínas son macromoléculas; son biopolímeros, es
decir, estan constituidas por gran número de unidades estructurales
simples repetitivas (monómeros). Debido a su
gran tamaño, cuando estas moléculas se dispersan en un disolvente adecuado, forman siempre dispersiones
coloidales, con características que las diferencian de las disoluciones
demoléculas mas pequeñas.
Por hidrólisis, las moléculas de
proteína se escinden en numerosos compuestos relativamente simples, de
masa pequeña, que son las unidades fundamentales constituyentes de la
macromolécula. Estas unidades son los aminoacidos, de los
cuales existen veinte especies diferentes y que se unen entre sí
mediante enlaces peptídicos. Cientos y miles de estos
aminoacidos pueden participar en la formación de la gran
molécula polimérica de una proteína.
La síntesis proteica es un proceso complejo
cumplido por las células según las directrices de la
información suministrada por los genes.
Las proteínas son largas cadenas de aminoacidos unidas por
enlaces peptídicos entre el grupo carboxilo (-COOH) y el grupo amino
(-NH2) de residuos de aminoacido adyacentes. La secuencia de aminoacidos
en una proteína esta codificada en su gen (una porción de
ADN) mediante el código genético. Aunque este
código genético especifica los 20 aminoacidos
'estandar' mas la selenocisteína y —en
ciertos Archaea— la pirrolisina, los residuos en una proteína
sufren a veces modificaciones químicas en la modificación
postraduccional: antes de que la proteína sea funcional en la
célula, o como
parte de mecanismos de control. Las proteínas también pueden
trabajar juntas para cumplir una función
particular, a menudo asociandose para formar complejos proteicos
estables.
ESTRUCTURA
Es la manera como
se organiza una proteína para adquirir cierta forma. Presentan una
disposición característica en condiciones fisiológicas,
pero si se cambian estas condiciones como temperatura, pH, etc. pierde
la conformación y su función, proceso
denominadodesnaturalización. La función depende de la
conformación y ésta viene determinada por la secuencia de
aminoacidos.
Para el estudio de la estructura es frecuente considerar una división
en cuatro niveles de organización, aunque el cuarto no siempre
esta presente.
Conformaciones o niveles estructurales de la disposición tridimensional
- Estructura primaria.
- Estructura secundaria.
- Nivel de dominio.
- Estructura terciaria.
- Estructura cuaternaria.
- A partir del
nivel de dominio sólo las hay globulares.
DESNATURALIZACIÒN
Si en una disolución de proteínas se producen cambios de pH,
alteraciones en la concentración, agitación molecular o
variaciones bruscas de temperatura, la solubilidad de las proteínas
puede verse reducida hasta el punto de producirse su precipitación.
Esto se debe a que los enlaces que mantienen la conformación globular se
rompen y la proteína adopta la conformación filamentosa. De este modo, la capa de moléculas de agua no recubre
completamente a las moléculas proteicas, las cuales tienden a unirse
entre sí dando lugar a grandes partículas que precipitan.
Ademas, sus propiedades biocatalizadores desaparecen al alterarse el centro
activo. Las proteínas que se hallan en ese
estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que fueron
diseñadas, en resumen, no son funcionales.
Esta variación de la conformación se denomina
desnaturalización. La desnaturalización no afecta a los
enlaces peptídicos: al volver a las condiciones normales, puede darse el
caso de que la proteína recupere la conformación primitiva, lo
que se denomina renaturalización.
Ejemplos de desnaturalización son la lechecortada como consecuencia de
la desnaturalización de la caseína, la precipitación de la
clara de huevo al desnaturalizarse la ovoalbúmina por efecto del calor o
la fijación de un peinado del cabello por efecto de calor sobre las
queratinas del pelo
PROTEÌNAS SEGÙN SUS PROPIEDADES:
Globulares: Son solubles en los sistemas acuosos,
es decir, podran circular por el torrente sanguíneo. Son cadenas
peptídicas que forman estructuras Globulares, de tal
manera que la cadena hidrófila queda hacia fuera y la hidrófoba
hacia dentro. Desde el punto de vista estructural, las proteínas
estan formadas por la sucesiva unión de aminoacidos (aa). Por tanto, al hidrolizar proteínas obtenemos
dichos aa.
Fibrosas: Son hidrófobas, por tanto insolubles en agua. Estan
formadas por largas cadenas peptídicas que dan una estructura de resistencia
paralela a un eje.
PROTEÌAS SEGÙN SU SOLUBILIDAD
Las proteínas fibrosas son insolubles en H2O. Las
proteínas globulares generalmente son solubles en H2O o soluciones
salinas débiles.
Las distintas solubilidades de las proteínas son de
ayuda en ciertos casos, pero no son útiles para su clasificación.
Es posible formar sales de proteínas haciéndolas precipitar con
sulfato de amonio saturado. Cuando la concentración de sulfato de amonio
se reduce al 50%, algunas se disuelven mientras otras continúan
precipitadas.
Las globulinas se diferencian de la albúmina por su
solubilidad.
OBJETIVO
Observar el comportamiento de una proteína globular hidrosoluble en
solución acuosa en función de la fuerza iónica.
METODOLOGÌA:
Buscamos soluciones con las cuales pusimos a reaccionar laproteína que
utilizamos, que fue la albúmina de huevo de gallina, las sustancias
utilizadas fueron:
* Etanol
* Jugo de naranja
* Jugo de limón
* Acetona
* Bicarbonato de sodio
* Vinagre
* Jabón liquido
* Aceite de cocina
Una vez teniendo estas soluciones pusimos a reaccionar la albúmina con
cada uno de ellos y esto es lo que observamos:
RESULTADOS:
MUESTRAS | OBSERVACIONES |
Albúmina con Acetona | se desnaturalizò, quedò como
peganda en las paredes del vaso |
Albúmina con Etanol | se desnaturalizò. Se separò un poco y una parte quedò flotando sobre el etanol |
Albúmina con Bicarbonato de Na Saturado. | se
desnaturalizò una parte ya que se veìa sòlo de unas partes
como separado |
Albúmina con Jugo de Limón | si se desnaturalizó |
Albúmina con Aceite de cocina | no se esnaturalizò, se
veìa normal pero grasoso y ya |
Albúmina con Jugo de Naranja | no desnaturalizò, no pasò
nada |
Albúmina con Cloruro de Na Saturado. | si se
desnaturalizò un poco |
Albúmina con Vinagre | si hay desnaturalización. |
Título: fraccionamiento de albumina a baja temperatura utilizando
caprilato de sodio como
un agente de division
resumen: soluciones de albumina terapeutica derivada de plasma altamente
estables, que tienen un nivel de turbiedad de 5 ntu o menos pueden obtenerse
mediante la adicion de caprilato de sodio para fraccionar el efluente de cohn
ii+iii o iv-1 a relativamente bajas temperaturas. El caprilato de sodio actua como
un agente de division para separar albumina de proteinas no deseadas. En
realizaciones preferidas, la temperatura de la solucion de origen
dealbumina se eleva, aumenta el ph y se hace reaccionar durante aproximadamente
durante seis horas bajo condiciones suficientes para romper el coloide de la
solucion inicial, y dividir el sobrante que contiene albumina de la fase de
coloidal dispersa, que retiene globulinas no deseadas y desechos de
fabricacion. Como
tiende a ser una molecula desperdicio, la albumina es selectivamente
estabilizada mediante una diafiltracion contra un
separador que contiene caprilato de sodio, asegurando asi un alto contenido de
monomero de albumina y un bajo nivel de turbiedad. La cantidad de caprilato de
sodio requerida para la estabilizacion selectiva, esta determinada por la
cantidad de emplazamientos de enlace disponibles en la
molecula de albumina.
<la desnaturalización es un cambio estructural de
las proteínasoacidos nucleicos,donde
pierden
suestructura nativa , y de esta forma su óptimo funcionamiento y a veces también cambian sus propiedades físico-químicas. Las proteínas sedesnaturalizan cuando pierden su estructuratridimensional ( conformación
química ) yasí su característico plegamientode suestructura. Las proteínasson filamentos largos
deaminoacidos unidos en una secuencia específica. Son creadas por losribosomasque 'leen' codonesde
los genes yensamblan la combinación requerida de
aminoacidos por la instrucción genética. Las proteínas reciéncreadas
experimentan una modificación en la que
seagreganatomosomoléculasadicionales, como el cobre ,zincehierro.
Una vez que finaliza este proceso,la proteína comienza a plegarse sin alterar su secuencia
(espontaneamente, y a veces con asistencia.
Deenzimas ) de forma tal que los elementoshidrofobitosde
la proteína son encerrados dentro de su estructura y los
elementoshidrofilitosson llevadosal exterior. La forma final de la
proteína determinacómo interaccionara con el entorno.si la
forma de la proteína es alterada por algún
factor externo (por ejemplo, aplicandole calor,acidosoalcalis ),
no es capaz de cumplir su función celular. La coagulación
se refiere al proceso dedesestabilización de las partículas suspendidas demodo
que se reduzcan las fuerzas de separación
entreellas para la coagulación existen también dosmodelos.
El primero es llamado ortocinético, el cual es
promovido por agitación externa principalmente. Influyen
partículas de tamaño superior al micrón
ytiene relación con los gradientes de velocidad del líquido. El segundo modelo se llama pericinético y sediferencia
del
primero en que su fuente deagitación esinterna. Principalmente importaran el movimientobrowniano y la sedimentación. Su efecto es principalmente
sobre partículas de tamaño inferior a 1micrón.modelos
físicos de la coagulación
A ) desnaturalización de las proteínas:
Las propiedades físico-químicas y biológicas de
las proteínas se alteran profundamente cuando se
sometena la acción de agentes físico-químicos capaces deromper los diferentes enlaces que estabilizan lasestructuras
1ª, 2ª, 3ª y 4ª de las proteínas. Detal
formaque la estructura altamente ordenada de una
proteínaqueda reducida al llamado polímero estadísticoformado
por la cadena de aminoacidos. Estos agentes pueden ser muy
diversos y se denominan en general,agentes
desnaturalizantes. En esta practica se estudianalgunos
de los mas importantes
Efecto de latemperatura
El calor es uno de los agentes primordiales dedesnaturalización,
la mayor parte de las proteínas
ensolución son inestables a temperaturas superiores a60ºc. Las alteraciones que sufre la moléculadisminuyen
su solubilidad y generalmente precipitanen forma de agregados insolubles.
Esta propiedad delas proteínas se denomina
coagulación.
DESNATURALIZACION DE LA ALBUMINA
El àcido clorhìdrico aumenta la concentraciòn de protones del
medio, (disminuye el pH).
El exceso de protones cambia las cargas de los grupos ionizables que permiten
mantener la estructura terciaria de la proteìna (albùmina),
asì como
tambièn afecta las uniones puente de hidrògeno de la estructura
secundaria.
La pèrdida de todas las estructuras protèicas, (excepto la
primaria), se conoce como
desnaturalizaciòn, y tiene como
consecuencia la pèrdida de las funciones biológicas
POR TEMPERATURA
El àcido clorhìdrico aumenta la concentraciòn de protones del medio, (disminuye el
pH).
El exceso de protones cambia las cargas de los grupos ionizables que permiten
mantener la estructura terciaria de la proteìna (albùmina),
asì como
tambièn afecta las uniones puente de hidrògeno de la estructura
secundaria.
La pèrdida de todas las estructuras protèicas, (excepto la
primaria), se conoce como desnaturalizaciòn, y tiene como consecuencia
la pèrdida de las funciones biológicas
AGENTES ORGANICOS
Soluciones organicas como la urea o el clorhidrato de guanidina
(GuHCI) (2,3,4), son agentes desnaturalizantes de la proteína, el
desplegamiento esta acompañado por la interacción no
covalente del
agente desnaturalizante con lasmoléculas de proteína. La
desnaturalización necesita una alta
concentración de urea y
clorhidrato de guanidina (6 M de GuHCl y 8 M de urea), lo que indica
que las interacciones no pueden ser ni fuertes ni específicas. La
desnaturalización es entonces una consecuencia particular de un
fenómeno termodinamico general, la unión preferencial de
los
componentes del solvente a la proteína, es decir, una solvatación
preferencial, que se une preferencialmente a la proteína. En
consecuencia la acción del agente se define exclusivamente por el
balance entre las afinidades de la proteína con los agentes
desnaturalizantes
DESNATURALIZACION EN REACCIONES ENZIMATICA
Aunque las leyes generales de la catalisis debieran ser
validas para las enzimas, el hecho de que éstas sean sustancias
complejas, de alto peso molecular, de tamaño coloidal y de
composición difícil de precisar, impide la aplicación de
dichas leyes de una manera estricta; por ejemplo, su tamaño coloidal
puede causar fenómenos de adsorción o diversas reacciones debidas
a sus numerosas cargas eléctricas. No obstante, los factores que afectan
la velocidad de la reacción enzimatica son los ya
señalados a propósito de las reacciones
químicas en general, como la temperatura y las
concentraciones de las sustancias reaccionantes que, en este caso particular,
son la enzima el sustrato. Ademas intervienen el PH medio donde se
realiza la reacción, la presencia de los productos de la reacción,
y otros factores secundarios como las radiaciones y los efectos
óxido – reductores.
